Введение
Часть I. Обзор литературы 7
1.1.. Методы картирования генов 7
1.2.Гибридизация соматических клеток 10
I.3.Селективные и полуселективные методы выделения гибридных клеток 16
1.4. Элиминация хромосом в межвидовых гибридных клетках 25
1.5.Идентификация хромосом в кариотипах гибридных клеток 30
1.6.Идентификация продуктов действия генов 35
1.7.Статистические методы анализа хромосом в гибридных клетках 37
Часть 2. Экспериментальные исследования 39
2.1.Материалы и оборудование 39
2.I.I.Биологический материал 39
2.1.2.Посуда 39
2.1.3.Среды и реактивы 40
2.1.4.Прибрры и оборудование 41
2.2.Методики выполнения работы 42
2.2.1. Получение первичных культур клеток 42
2.2.2.Выделение лимфоцитов 43
2.2.3.Культивирование клеток 44
2.2.4.Слияние клеток 46
2.2.5.Окрашивание и анализ гибридных кариотипов 48
2.2.6.Электрофоретический анализ гибридных клонов 49
2.2.7.Статистический анализ гибридных клонов 51
Часть 3. Результаты исследования 54
3.1. Кариотипы родительских клеток 54
3.І.І.Характеристика кариотипа крупного рогатого скота 54
3.1.2.Характеристика перевиваемой линии клеток СН0-К1пРо~59
3.2.Поиск наилучших вариантов слияния клеток 62
3.3.Кариологический анализ гибридных клонов 66
3.4.Картирование полигенного признака про+ методами пря
мой и обратной селекции гибридных клонов 80
3.5.Анализ данных электрофоретического разделения экстрак
тов клеток гибридных клонов 85
3.б.Локализация генов ЛДГ-А,ЛДГ-В,Г6ФД и обсуждение полу
ченных результатов по картированию генов 91
Выводы 100
Список литературы
