Введение
I.Обзор литературы 9
1 Атаксия-телеангиэктазия 9
2. Основные сигнальные пути в ответ на повреждения ДНК. Протеинкиназа ATM 12
3. Эпигенетическая регуляция хроматина при ускоренном старении
3.1 Структура хроматина .17
3.2 Структура хроматина при двунитевых разрывах ДНК 24
3.3 Эпигенетические модификации хроматина 25
3.4 Посттрансляционные модификации гистонов .28
4.Триметилированные формы гистона H3 – Н3К9me3 и Н3К27me3 при трансформации и старении клетки .33
5. Гистоновые деацетилазы SIRT1 и SIRT6 при старении клетки ..37
5.1 Деацетилаза SIRT1 43
5.2 Деацетилаза SIRT6 48
6. Ядерная ламина при старении клетки .51
II. Материалы и методы 60
1. Культивирование клеток 60
2. Получение первичных фибробластов .61
3. Иммунофлуоресценция 61
4. Микроскопия и анализ изображений 62
5. Статистическая обработка результатов 62
III. Результаты и обсуждение .63
I. Выявление фосфорилированной (активной) формы протеинкиназы АТМ (фосфо-АТМ) 63
II. Выявление ферментативной активности протеинкиназ фосфо-АТМ и ATR в клетках больной синдромом Секкеля 69
III. Выявление ферментативной активности протеинкиназ АТМ
и ATR в исследуемых линиях 71
3.2. Интенсивность флуоресценции гистоновых деацетилаз SIRT1 и SIRT6 в исследуемых линиях 77
3.3. Интенсивность флуоресценции триметилированных форм гистона Н3 H3K9me3 и H3K27me3 83
3.4. Выявление гетерохроматинового маркера HP1- .86
3.5. Накопление аберраций ядерной ламины .89
3.6 Определение количества SA--галактозидазы в исследуемых линиях 94
3.7. Измерение длин теломер .97
Заключение 101
Выводы 107
Список литературы
