Введение
Литературный обзор 8
Гемотрансмиссивные инфекции: возбудители и их идентификация 8
Характеристика основных инфекционных агентов, передающихся через кровь. 8
Вирус иммунодефицита человека (HIV) 10
Вирус гепатита С (HCV) 11
Вирус гепатита В (HBV) 12
Т-лимфотропные вирусы человека I и II типов (HTLV-1,2) 14
Вирус Эпштейна-Барр 15
Вирусы простого герпеса 1 и 2 типов 16
Цитомегаловирус 17
Вирусы герпеса человека 6, 7 и 8 типов, парвовирусВ19 18
Проблема безопасности донорской крови 20
Методы идентификации возбудителей гемотрансмиссивных инфекций 21
Серологические методы идентификации возбудителей гемотрансмиссивных инфекций 21
Методы идентификации возбудителей гемотрансмиссивных инфекций, основанные на обнаружении нуклеиновых кислот 22
Амплификационные методы в скрининге донорской крови 26
Амплификационные методы количественного определения нуклеиновых кислот 29
Количественное определение нуклеиновых кислот по "конечной точке".. 30
Способы регистрации продуктов амплификации нуклеиновых кислот 32
Количественное определение нуклеиновых кислот методом амплификации с регистрацией результатов в режиме реального времени 45
Материалы и методы 50
Результаты и обсуждение 55
Метод мультиплексной qPCR на микрочипе 55
Обработка данных кинетики накопления флуоресцентного сигнала 60
Выбор оптимальных условий проведения мультиплексной PCR на микрочипе и регистрации продуктов амплификации 62
Количественная мультиплексная РСЯна микрочипе 68
Выбор генетических мишеней для обнаружения вирусных нуклеиновых кислот 69
Определение пределов обнаружения вирусных нуклеиновых кислот 72
Калибровочные кривые для количественного определения нуклеиновых кислот 74
Одновременный количественный анализ нуклеиновых кислот HIV-1, HBV и HCV методом qPCR на микрочипе 77
Исследование образцов плазмы крови человека методом мультиплексной qPCR на микрочипе 78
Заключение 82
Выводы 83
Благодарности 84
Список литературы 85
