Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1 Глубокое замораживание как способ сохранения биоразнообразия растений
1.1.1 Преимущества криосохранения 7
1.1.2 Особенности криосохранения растительных клеток. 8
1.1.3 Криосохранение семян 9
1.1.4 Криосохранение изолированных клеток и органов, культивируемых vitro 10
1.1.5 Криосохранение орхидных 12
1.2 Механизмы повреждения растительных клеток при криосохранении:
1.2.1 Образование льда и витрификация в воде и растворах 13
1.2.2 Повреждения, вызванные образованием внутриклеточного льда 18
1.2.3 Повреждения, вызванные образованием внеклеточного льда 19
1.2.4 Другие механизмы повреждений 22
1.2.5 Роль плазматической мембраны в повреждении клеток при криосохранении 25
1.3 Криопротекторы 28
1.4 Основные методы в криосохранении. 38
1.4.1 Медленное замораживание. 39
1.4.2 Витрификация 44
1.4.3 Другие методы криосохранения 46
1.5 Методические особенности криосохранения
1.5.1 Предварительная подготовка культуры
1.5.2 Рекультивирование и регенерация 53
1.6 Влияние криосохранения семян и культур in vitro на последующее развитие растений 56
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1 Объект исследований 62
2.2 Криосохранепие семян 62
2.3 Получение ювенильныхрастений. 62
2.4 Получение культуры почкующихся протокормое 64
2.5 Глубокое замораживание протокормое 65
2.6 Оценка повреждений протокормое при замораживании-оттаивании . 67
2.7 Изучение влияния глубокого замораживания на развитие семян, протокормое и ювенильных растений 69
Глава 3. Результаты
3.1 Криосохранепие семян 70
3.2 Получение ювенильных растений. 70
3.3 Получение культуры почкующихся протокормое 71
3.4 Глубокое замораживание протокормое 75
3.4.1 Медленное замораживание 76
3.4.2 Витрификация 76
3.5 Оценка повреждений протокормое при замораживании-оттаивании. 83
3.5.1 Окрашивание 83
3.5.2 Исследование фотосинтетической активности 85
3.6 Влияние глубокого замораживания на развитие семян, протокормое и ювенильных растений 93
Глава 4. Обсуждение 98
Выводы 116
Заключение 118
Благодарности 119
Список литературы 120
