Введение
I. Введение 6
II. Обзор литературы 9
2.1. Актин 9
2.2. Тредмиллинг 12
2.3. Динамика актина в клетке 15
2.4. ADF/кофилины 18
2.5. ПрофилиниТр4 20
2.6. Кэпирующие белки и гельзолин 22
2.7. Комплекс Агр2/3 24
2.8. Белки семейства WASP 27
2.9. Listeria monocytogenes и белок ActA 31
2.10. Белки семейства Ena/VASP 35
III. Материалы и методы исследования 41
3.1. Белки 41
3.2. Исследование взаимодействия комплекса Агр2/3 и VASP in vitro 41
3.3 Полимеризационные тесты 42
3.4. Видеомикроскопия 42
3.5. Listeria monocytogenes 43
3.6. ActA-полистиреновые бусины 43
3.7. Статистическая обработка данных 45
IV. Результаты и обсуждение 46
4.1. Для создания новых филаментов комплексом Агр2/3 необходимы плюс-концы существующих актиновых филаментов 46
4.2. Актиновые филаменты, растущие из одного узла разветвления, имеют равные длины 47
4.3. Новые актиновые филаменты растут с плюс-концов филаментов-затравок 48
4.4. Комплекс Агр2/3 не взаимодействует с VASP 51
4.5. VASP не оказывает эффекта на кинетики полимеризации актина в присутствии комплекса Агр2/3, активированного растворимым ActA 51
4.6. VASP увеличивает плотность ветвления актиновых филаментов комплексом Агр2/3, но не меняет кинетики их деветвления 53
4.7. ActA-микросферы 53
4.8. VASP необходим для движения ActA-микросфер 54
4.9. VASP усиливает нуклеаторный эффект комплекса Агр2/3, активированного ActA на поверхности полистиреновых микросфер и Listeria monocytogenes 57
4.10. VASP связывает актиновые филаменты с ActA на поверхности полистиреновых микросфер независимо от комплекса Агр2/3 58
4.11. VASP не связывается с плюс-концами актиновых филаментов и не препятствует кэпированию плюс-концов филаментов кэпирующими белками 59
4.12. VASP не участвует в регуляции процесса кэпирования плюс-концов филаментов кэпирующими белками при движении ActA-микросфер 60
4.13. VASP уменьшает плотность ветвления актиновых филаментов ActA-активированным комплексом Агр2/3, увеличивая расстояние между соседними точками ветвления 62
V. Заключение 65
VI. Основные выводы 69
Благодарности 70
Список литературы
