Введение
1. Обзор литературы 11
1.1. Жирные кислоты, структура, физико-химические свойства 12
1.2. Освобождение жирных кислот из мембран 14
1.2.1. Классификация фосфолипаз Аг 16
1.2.2. Функциональное значение и регуляция фосфолипазы Аг 19
1.2.3. Контроль за уровнем жирных кислот в клетке 22
1.3. Биологическая роль жирных кислот 23
1.3.1. Биологические эффекты арахидоновои кислоты 25
1.3.2. Пути метаболизма арахидоновои кислоты 27
1.3.2.1. Циклооксигеназный путь метаболизма арахидоновои кислоты 28
1.3.2.2. Липоксигеназный путь метаболизма арахидоновои кислоты 31
1.3.2.3. Цитохром Р450 путь метаболизма арахидоновои кислоты 33
1.3.3. Влияние жирных кислот на синаптическую передачу 34
1.4. Механизмы действия жирных кислот 37
1.4.1. Влияние жирных кислот на физические свойства мембран 38
1.4.2. Влияние жирных кислот на ионные каналы 39
1.4.2.1. Влияние жирных кислот на кальциевые каналы 40
1.4.2.2. Влияние жирных кислот на калиевые каналы 42
1.4.2.3. Влияние жирных кислот на натриевые каналы 44
1.4.2.4. Влияние жирных кислот на хлорные каналы 45
1.4.2.5. Влияние жирных кислот на ионотропные рецепторы 45
1.4.3. Влияние жирных кислот на внутриклеточные сигнальные системы 47
1.4.4. Влияние жирных кислот на процессы экзо- и эндоцитоза 50
2 Объект и методы исследования 60
2.1. Объект исследования 60
2.2. Растворы и фармакологические вещества 61
2.3. Изготовление, заполнение и подведение микроэлектродов 62
2.4. Регистрация биопотенциалов 63
2.5. Анализ синаптических сигналов 66
2.6. Статистическая обработка экспериментальных данных 67
2.7. Флуоресцентная микроскопия 68
2.8. Применение FM1-43 69
2.9. Регистрация свечения 69
2.10. Анализ изображений 71
3 Результаты исследования 72
3.1. Эффекты арахидоновой кислоты на спонтанную и вызванную секрецию ацетилхолина и ионные токи двигательного нервного окончания 72
3.2. Влияние арахидоновой кислоты на секрецию медиатора и амплитуду третьей фазы ответа нервного окончания при ритмическом раздражении 75
3.3 Эффекты ингибиторов фосфолипазы А2 на нервно-мышечную передачу 80
3.4. Исследование роли липоксигеназ и циклооксигеназ в эффектах арахидоновой кислоты на секрецию медиатора и ионные токи нервного окончания 81
3.5. Эффекты простагландина Е2 на секрецию медиатора и ионные токи двигательного нервного окончания 83
3.6. Влияние простагландина Е2 на секрецию медиатора и амплитуду третьей фазы ответа нервного окончания при ритмическом раздражении 86
3.7. Влияние насыщенных и ненасыщенных жирных кислот на секрецию медиатора и ионные токи нервного окончания 89
3.8. Влияние насыщенных и ненасыщенных жирных кислот на секрецию медиатора и амплитуду третьей фазы ответа нервного окончания при ритмическом раздражении 91
3.9. Влияние неметаболизируемого аналога арахидоновой кислоты - ETYA на нервно-мышечную передачу 97
3.10. Действие детергента - деоксихолата на нервно-мышечную передачу 99
3.11. Влияние арахидоновой кислоты на процессы экзо- и эндоцитоза в двигательных нервных окончаниях 100
4. Обсуждение результатов ПО
4.1. Влияние арахидоновой кислоты на секрецию медиатора и ионные токи двигательного нервного окончания ПО
4.2. Эндогенный синтез арахидоновой кислоты в области нервно-мышечного синапса 112
4.3. Роль метаболитов арахидоновой кислоты в модуляции секреции медиатора и ионных токов двигательного нервного окончания. 114
4.4. Влияние арахидоновой кислоты и простагландина Ег на секрецию медиатора и амплитуду третьей фазы ответа нервного окончания при ритмическом раздражении 116
4.5. Прямые эффекты арахидоновой кислоты на механизм секреции медиатора и ионные каналы двигательного нервного окончания 117
4.6. Исследование роли арахидоновой кислоты и фосфолипазы Аг в процессах эндоцитоза синаптических везикул 119
Выводы 126
Список литературы 128
