Введение
Глава 1. Физиолого-биохимические особенности Yarrowia lipolytica
1.1. История изучения и распространение в природе 11
1.2. Ассимиляция источников углерода 14
Глава 2. Секреция органических кислот - интермедиатов ЦТК
2.1. Микробный биосинтез органических кислот 32
2.2. Лимонная и Tpeo-Ds-изолимонная кислоты 34
2.3. Пировиноградная кислота 44
2.4. а-Кетоглутаровая кислота 54
Глава 3. Организация и регуляция ЦТК и глиоксилатного цикла у микроорганизмов
3.1. Биохимия образования лимонной кислоты грибами Aspergillus niger 60
3.2. Физиологические основы биосинтеза лимонных кислот у Y. lipolytica 44
3.3. Физиологические основы биосинтеза кетокислот у Y. lipolytica 70
3.4. Характеристика ключевых ферментов ЦТК и глиоксилатного цикла у микроорганизмов 72
Глава 4. Структурно-функциональная организация метаболических путей
4.1. Компартментализация и регуляция метаболических путей 85
4.2. Надмолекулярные ферментные комплексы 87
4.3. Связывание ферментов с клеточными мембранами 93
4.4. Метаболические каналы внутри надмолекулярных ферментных комплексов 96
Глава 5. Материалы и методы исследования
5.1. Микроорганизмы и условия выращивания 99
5.2. Аналитические методы 100
5.3. Определение активности ферментов 101
5.4. Субклеточное фракционирование дрожжей 102
5.5. Очистка ферментов глицеролкиназы, липазы, цитратсинтазы и НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназы 109
5.6. Пермеабилизация клеток Y. lipolylica 112
5.7. Связывание цитратсинтазы Y. lipolylica с внутренней мембраной митохондрий 112
5.8. Иммунноэлектронная микроскопия 113
5.9. Хроматография Hummer-Dreyer 113
5.10. Осаждение комплекса цитратсинтазы/малатдегидрогеназы полиэтиленгликоле и проведение сопряженных реакций с ферментами "ловушками" 114
5.11. Методика исследования метаболических эффектов нарушения локализации цитратсинтазы у дрожжей 115
5.12. Получение слитого белка цитратсинтазы/малатдегидрогеназы 120
Глава 6. Пути метаболизма глицерина, растительных масел и глюкозы Y. lipolytica
6.1. Пути метаболизма глицерина 123
6.2. Субклеточная локализация ферментов метаболизма глицерина 127
6.3. Очистка и свойства глицеролкиназы 129
6.4. Физиологическая роль глицерол-3-фосфат-дегидрогеназ 133
6.5. Особенности ассимиляции триглицеридов растительных масел и продуктов их гидролиза
6.6. Очистка и свойства липазы 146
6.7. Особенности регуляции ключевых ферментов метаболизма глюкозы у Y. lipolytica 150
6.8. Индукция ферментов глиоксилатного цикла у Y. lipolytica и в органах млекопитающих 161
Глава 7. Сверхсинтез органических кислот дрожжами Y. lipolytica
7.1. Механизмы сверхсинтеза пировиноградной и а-кетоглутровой кислот при росте в среде с глицерином, глюкозой и этиловым спиртом 170
7.2. Механизмы сверхсинтеза лимонных кислот на различных источниках углерода 189
7.3. Очистка и свойства цитратсинтазы 195
7.4. Очистка и свойства НАД-зависимой изоцитратдегидрогеназы 199
7.5. Биохимический механизм сверхсинтеза лимонной кислоты из глюкозы у Y. lipolytica 205
Глава 8. Надмолекулярная организация ЦТК
8.1. Изучение регуляции цитратсинтазы Y. lipolytica в условиях in situ
8.2. Связывание цитратсинтазы Y. lipolyiica с внутренней мембраной митохондрий
8.3. Фермент-ферментные взаимодействия между цитрагсинтазой и малатдегидрогеназой в полиэтиленгликоле
8.4. Субстратный канал оксалоацетата внутри слитого белка цитратсинтазы/малатдегидрогеназы
8.5. Метаболические эффекты дислокализации цитратсинтазы в клетках дрожжей
V. Заключение
VI. Выводы
VII. Список литературы
