Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Активные формы кислорода 11
1.2. Роль параоксоназы 1 в развитии ИБС 16
1.2.1 Семейство параоксоназы 17
1.2.2 Структура и свойства белка-фермента параоксоназы 1 17
1.2.3 Субстраты параоксоназы 1 18
1.2.4 Содержание и активность параоксоназы 1 в организме 20
1.2.5 Варианты гена PON1 и их влияние на активность параоксоназы 1 21
1.2.6 Роль вариантов Q192R и L55M гена PON1 в развитии ишемической болезни сердца 23
1.2.7. Варианты в регуляторных областях гена PON1 24
1.3. Роль супероксиддисмутаза в развитии ИБС 25
1.3.1. Семейство супероксиддисмутазы 26
1.3.2 Супероксиддисмутаза 2 (СОД2) 29
1.3.3 Полиморфизм супероксиддисмутаза 2 (SOD2) 31
1.4 Роль каталазы в развитии ИБС 32
1.4.1 Полиморфизм гена каталазы (CAT) 33
1.5 Ишемическая болезнь сердца и свободнорадикальное окисление липидов 34
Экспериментальная Часть
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Объект исследования 42
2.2. Клиническая характеристика обследуемых групп: 43
2.3. Биохимические методы исследования 43
2.3.1. Определение окислительной модификации белков плазмы крови 43
2.3.2. Электрофоретические методы 45
2.3.3. Определение содержания малонового альдегида в сыворотке и эритроцитах крови 45
2.3.4. Определение активности параоксоназы сыворотки крови 46
2.3.5. Определение активности эритроцитарной каталазы 47
2.3.6. Определение активности супероксиддисмутазы 48
2.3.7. Определение липидных и липопротеиновых показателей сыворотки крови 48
2.4. Методы генетического исследования .- 49
2.4.1. Q192R полиморфизм гена параоксоназы 1 (PON1) 50
2.4.2. L55M полиморфизм гена параоксоназы 1 (PON1) 50
2.4.3. C-262T полиморфизм гена каталазы (CAT) 51
2.4.4. Ala 16 Val полиморфизм гена супероксиддисмутазы2 (SOD2) 52
2.5. Методы статистики, использованные в работе 52
2.5.1 Номинальные случайные переменные 53
2.5.2 Порядковые случайные величины 53
2.5.3 Непрерывные случайные величины 54
2.5.4 Относительные случайные переменные 54
Глава 3. Результаты экспериментов
3.1. Оценка проксидантной активности крови 56
3.1.1. Исследование состояния белков в крови больных при инфаркте миокардом 56
3.1.2. Перекисное окисление липидов 60
3.2. Активность антиоксидантной системы 61
3.2.1. Активность ферментов-антиоксидантов, уровень МДА и липидных показателей сыворотки крови 63
3.3. Молекулярно-генетическое тестирование и сравнительный анализ распределения аллелей генов PON1 (Q192R и L55M), CAT (С-262Т) и SOD2 (A16V) у мужчин и женщин, здоровых и больных ИБС 65
3.3.1. Анализ частот аллелей и генотипов Q192R renaPONl в исследуемых группах мужчин и женщин 65
3.3.2. Анализ встречаемости аллелей и генотипов CAT в исследуемых группах мужчин и женщин 69
3.3.3. Анализ частот аллелей и генотипов SOD2 в исследуемых группах мужчин и женщин 71
3.4. Анализ встречаемости сочетания аллелей 16Val гена SOD2, -262Т гена CAT,192R гена PON1 и 55М гена PON1 у пациентов исследованных групп мужчин и женщин 74
3.5. Изучение прооксидантных и антиоксидантных факторов и молекулярно-генетических маркеров генов PON1 (Q192R и L55M), CAT (С-262Т) и SOD2 (A16V) у пациентов, перенесших инфаркт миокарда, и в контрольной группе 76
3.5.1. Анализ активности ферментов антиоксидантной системы у больных ИМ до 45 лет и здоровых мужчин 75
3.5.2. Изучение уровня малонового альдегида в сыворотке крови в обследованных группах мужчин при различных генотипах PON1 (Q\92RnL55M), CAT(C-26TY)иSOD2(A\6V) 79
3.6. Анализ липидного спектра в группах мужчин и женщин, носителей разных аллелей гена PON1 Q192R и L55M 80
3.6.1. Анализа липидного спектра в группах мужчин и женщих, носителей ,разных аллелей гена САТ. 83
3.6.2 Анализ липидного спектра у носителей различных вариантов гена SOD2 88
Глава 4. Обсуждение результатов 93
Выводы 114
Список цитируемой литературы 117
