Введение
Глава 1. Современное состояние и перспективы фармакогностических исследований растений рода Euphrasia 23
1.1. Ботаническое описание, систематическое положение и распространение 23
1.2. Биологические особенности и явление сезонного полиморфизма 36
1.3. Химический состав 38
1.4. Биологическая активность и перспективы использования в медицине
1.4.1. Фармакологические исследования и данные о применении в научной и народной медицине 45
1.4.2. Обоснование перспективности изучения растений рода Euphrasia для использования в фармации 47
Выводы по главе 1 55
Экспериментальная часть 57
Глава 2. Объекты и методы исследования 57
2.1. Объекты исследования 57
2.2. Методы морфолого-анатомических исследований 61
2.3. Методы химических исследований 63
2.3.1. Исследование продуктов первичного метаболизма и
пигментов
2.3.1.1. Методы исследования углеводов 63
2.3.1.2. Методы исследования аминокислот 64
2.3.1.З. Методы исследования липофильных веществ 67
2.3.1.4. Методы исследования пигментов 68
2.3.2. Исследование продуктов вторичного метаболизма 71
2.3.2.1. Методы качественного анализа 71
2.3.2.2. Методы количественного анализа 74
2.3.2.3. Изучение фенольных соединений методом ВЭЖХ 77
2.3.3. Исследование макро- и микроэлементного состава 78
2.4. Общие методики стандартизации сырья 78
2.4.1. Методы отбора проб для анализа 78
2.4.2. Определение числовых показателей качества сырья 78
2.4.3. Определение микробиологической чистоты сырья 79
2.4.4. Определение содержания радионуклидов 79
2.4.5. Определение сроков хранения сырья 79
2.4.6. Статистическая обработка данных 79
2.5. Методы фармакологических исследований 79
2.5.1 Изучение антикоагулянтной активности 80
2.5.4. Изучение антимикробной активности 80
2.5.5. Определение антирадикальной активности 81
2.5.6. Изучение острой токсичности 82
2.5.7. Статистическая обработка результатов фармакологического эксперимента 82
2.6. Маршруты экспедиций и методы ресурсоведческого исследования 82
ГЛАВА 3. Морфолого-анатомическое исследование долговегетирующих видов рода Euphrasia 83
3.1. Исследование морфологического строения 84
3.1.1. Сравнительно-таксономический анализ
макродиагностических признаков 91
3.1.2. Установление отличительных признаков морфологического строения возможной примеси ЛРС 96
3.2. Исследование анатомического строения 98
3.2.1. Сравнительно-таксономический анализ микродиагностических признаков 127
3.2.2. Установление отличительных признаков анатомического строения возможной примеси ЛРС 130
3.3. Проявляение анатомо-диагностических признаков измельченного лекарственного растительного сырья 135
Выводы по главе 3 144
ГЛАВА 4. Фитохимическое исследование лекарственного растительного сырья, характеризующегося полиморфизмом на примере рода euphrasia 145
4.1. Химический состав продуктов первичного метаболизма, пигментов и элементный состава 145
4.1.1. Исследование углеводного состава 145
4.1.1.1. Качественный состав свободных и связанных углеводов 145
4.1.1.2. Выделение углеводных фракций из травы Е. brevipila 148
4.1.1.3. Химический состав углеводных фракций
4.1.1.3.1. Исследование мономерного состава методом хроматографии на бумаге 151
4.1.1.3.2. Исследование мономерного состава методом газожидкостной хроматографии 152
4.1.1.4. Разработка методики количественного определения суммы углеводов в траве Е. brevipila 155
4.1.1.4.1. Разработка методики количественного определения низкомолекулярных Сахаров и полисахаридов, а так же их суммы из одной навески 157
Исследование количественного содержания углеводов 164
Исследование аминокислотного состава J69
1. Определение аминокислот методом жидкостной хроматографии на аминокислотном анализаторе 170
2. Изучение качественного состава методом TCX 172
3. Изучение количественного содержания свободных аминокислот по органам растений рода Euphrasia 174
Исследование липофильных веществ 177
1. Содержание жирного масла и состав жирных кислот масла семян 177
2. Содержание липофильных веществ в траве растений рода Euphrasia 180
Исследование пигментного состава 183
1. Выделение и идентификация основных фотосинтезирующих пигментов 184
2. Изучение качественного состава пигментов 187
3. Исследование количественного содержания пигментов
3.1. Сравнительный анализ содержания хлорофиллов и феофетинов 192
3.2. Количественное содержание каротиноидов 196
4. Роль фотосинтетических пигментов в жизнедеятельности гемипаразитических видов рода Euphrasia 197
Исследование макро- и микроэлементного состава 200
1. Элементный состав долговегетирующих видов рода Euphrasia 201
Химический состав продуктов вторичного метаболизм 205
Качественный анализ на содержание основных групп биологически активных веществ 205
Исследование фенольных соединений 207
4.2.2.1. Определение компонентного состава фенольных соединений методом ВЭЖХ 207
4.2.3. Исследование иридоидных соединений 210
4.2.4. Определение таксономической значимости продуктов вторичного метаболизма
4.2.4.1. Межвидовая изменчивость комплекса фенольных соединений в пределах рода 214
4.2.4.2. Межвидовая изменчивость иридоидного комплекса в пределах рода 222
4.2.4.3. Особенности внутривидовой изменчивости биохимических признаков под влиянием эколого-географических факторов 227
4.2.5. Таксономический анализ количественного содержания основных групп биологически активных веществ 236
4.2.5.1. Разработка методики количественного определения суммарного содержания гидроксикоричных кислот 236
4.2.5.2. Сравнительный анализ количественного содержания БАВ в траве и органах рода Euphrasia 240
4.2.5.3. Влияние географического фактора на накопления БАВ 244
Выводы по главе 4 249
ГЛАВА 5. Разработка технологии, стандартизация и фармакологические свойства фитосубстанций на основе растений рода euphrasia 252
5.1. Разработка технологии и стандартизация фитосубстанций 253
5.1.1. Оптимальные условия получения настойки и её стандартизация 253
5.1.1.1. Выбор концентрации экстрагента и измельченности сырья 253
5.1.1.2. Выбор метода экстрагирования 254
5.1.2. Стандартизация настойки 255
5.1.2.1. Методы испытания на подлинность 255
5.1.2.2. Определение сухого остатка, плотности и тяжелых металлов 263
5.1.2.3. Количественное определение 264
5.1.2. Разработка состава и технологии косметического
средства 265
5.1.2.1. Выбор оптимальных условий извлечения гидрофильного комплекса БАВ 265
5.1.2.2. Выбор структурообразующего компонента 267
5.1.2.3. Выбор оптимальных условий извлечения липофильного комплекса БАВ 268
5.1.2.4. Влияние концентрации витаминов в составе эмульсионной композиции на выход БАВ 268
5.2. Исследование фармакологических свойств и острой токсичности фитосубстанций 271
5.2.1. Изучение антикоагулянтной активности 271
5.2.4. Изучение антирадикальной активности 276
5.2.5. Изучение антимикробной активности 279
5.2.7. Изучение острой токсичности 282
Выводы по главе 5 283
ГЛАВА 6. Стандартизация сырья полиморфных видов лекарственных растений 284
6.1. Определение товароведческих показателей 285
6.1.1. Показатели доброкачественности производящих растений ЛРС цельного и резанного 285
6.1.2. Показатели доброкачественности модельных образцов ЛРС характеризующегося полиморфизмом на примере растений рода Euphrasia 288
6.1.3. Показатели доброкачественности природных образцов
ЛРС, содержащего смесь различных видов рода
Euphrasia 304
Выводы по главе 307
ГЛАВА 7. Проблемы и пути решения обеспеченности сырьевой базы рода euphrasia на территории пермского края 308
7.1. Распространение, экспедиционное обследование и запасы сырья в пермском крае 308
7.2. Экспериментальная интродукция и её влияние на изменчивость биохимических призанаков 316
7.2.1. Изменчивость биохимических параметров в условиях интродукции 317
Выводы по главе 7 322
Общие выводы 323
Список сокращений 328
Список литературы
