Введение
Глава 1 Обзор литературы. Оценка токсичности индивидуальных веществ, состояния
почв и плотных антропо-генных образований с использованием микроорганизмов. 10
Общие положения
1.1 Методы биотестирования 10
1.1.1 Биотестирование с использованием микроорганизмов 13
1.1.1.1 Угнетение роста микробной культуры 13
1.1.1.2 Ферментные тесты 14
1.1.1.3 Тесты, основанные на ингибировании люминесценции 16
1.1.1 Биотестирование с использованием других организмов 21
1.2 Методы, основанные на оценке состояния аборигенной микрофлоры 24
1.2.1 Определение состояния почв и плотных антропогенных образований на основе измерения микробной биомассы
1.2.2 Оценка состояния объектов на основе анализа процессов трансформации азота и углерода в почве
1.2.3 Оценка состояния почв на основании измерения ферментативной активности аборигенной микрофлоры
1.2.4 Оценка состояния экосистем на основе определения микробного - разнообразия и устойчивости сообществ
1.3 Влияние металлов на микроорганизмы 40
Глава 2 Материалы и методы исследования 44
2.1 Объекты исследования, культивирование, идентификация 44
2.1.1 Объекты исследования 44
2.1.2 Культивирование организмов 44
2.1.3 Идентификация организмов 44
2.1.3.1 Экстрагирование ДНК 44
2 1.3.2 Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) 45
2.1.3.3 Секвенирование продукта ПЦР 46
2.2 Методы биотестирования 47
2.2.1 Биотестирование объектов с использованием Bacillus pumilus КМ-21 47
2.2.1.1 Контактное биотестирование 47
2.2.1.2 Биотестирование водных образцов 48
2 2.1.3 Элюатное биотестирование 49
2.2.2 Определение дегидрогеназной активности аборигенной микрофлоры почвенных образцов
2.2.3 Биотестирование объектов с использованием Paramecium caudatum 49
2.2.4 Биотестирование объектов с использованием Ceriodaphma affinis 51
2.3 Анализируемые образцы 52
2.3.1 Водные растворы 52
2 3.2 Искусственно загрязненные почвенные образцы 52
2.3.3 Незагрязненные почвы с различным содержанием органического .-вещества
2.3.4 Почвы, обработанные компостом 53
2.3.5 Модельные образцы отходов 53
2.3.6 Промышленные отходы 54
2.4 Обработка и оценка результатов 55
Глава 3 Результаты и обсуждение 57
3.1 Выбор тест-объекта 57
3.1.1 Ростовые характеристики бактерий рода Bacillus 57
3.1.2 Дегидрогеназная активность бактерий рода Bacillus 59
3.1.3 Чувствительность бактерий рода Bacillus к стандартным токсикантам
3.2 Идентификация тест-объекта 63
3.3 Определение опрерационных параметров и стандартизация методики контактного биотестирования
3.3.1 Определение операционных параметров методики 68
3 3.2 Стандартизация условий биотестирования 70
3 3.3 Определение поправочного коэффициента при тестировании почвенных образцов
3.4 Определение метрологических характеристик методики контактного биотестирования
3.5 Определение концентраций стандартных токсикантов, вызывающих 50%-ный ингибирующий эффект
3.5.1 Определение концентраций стандартных токсикантов, вызывающих 50%-ный ингибирующий эффект, с помощью линейной модели
3.5.2 Определение концентраций стандартных токсикантов, вызывающих 50%-ный ингибирующий эффект, с помощью нелинейных методов
3.6 Анализ токсичности почвенных образцов, содержащих индивидуальные металлы, их смесь и органический токсикант, методами контактного и элюатного биотестирования
3.6.1 Анализ токсичности поченных образцов методами контактного и элюатного биотестирования
3.6.2 Определение токсичности почвенных образцов на основе оценки активности аборигенной микрофлоры
3.7 Анализ токсичности почвенных образцов, загрязненных хромом и кадмием, тестах с использованием Р caudatum и С affims
3.8 Использование методики контактного биотестирования для оценки класса опасности промышленных отходов и почв
3.8.1 Определение токсичности промышленных отходов 106
3.8.2 Создание ранжировочной таблицы для отнесения отходов к классам опасности
3.8.3 Определение классов опасности отходов на основании результатов биотестирования с использованием В pumilus, Р caudatum и С affims
Выводы 117
