Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Актуальность поиска лекарственных препаратов с антиоксидантным действием 13
1.2. Современные представления об антиоксидантах 15
1.2.1. Антиоксид анты прямого действия. Классификация. Механизмы действия 17
1.2.2. Прооксидантное действие антиоксидантов 25
1.3. Модельные системы перекисного окисления липидов для оценки антиоксидантной активности химических соединений в опытах in vitro .27
1.3.1. Особенности перекисного окисления липидов 29
1.3.2. Субстраты для модельных систем перекисного окисления липидов .31
1.3.3. Способы инициации перекисного окисления липидов в модельных системах 38
1.3.4. Индикация интенсивности процессов свободнорадикального окисления липидов в модельных системах 43
Глава 2. Материалы и методы исследования 52
Материалы и реактивы 52
Оборудование 52
Приготовление липосом 53
Окисление липосом 53
Определение концентрации карбонильных соединений с использованием N- (2,4-динитрофенил) гидразина 53
Определение концентрации веществ, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой 54
Определение содержания конъюгированных диенов и кротонового альдегида 54
Исследованные химические соединения 54
Оценка эффективности антиоксидантного действия 55
Статистические методы 56
Глава 3. Разработка и оптимизация применения модельной системы для оценки антиоксидантного действия веществ на основе липосом 57
3.1. Сравнительная оценка применимости методов определения карбонильных продуктов ПОЛ с использованием тиобарбитуровой кислоты и 2,4-динитро-фенилгидразина в липосомальной модельной системе 57
3.1.1. Применимость метода определения веществ, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ВР-ТБК), для оценки уровня ПОЛ в модельной системе 57
3.1.2. Применимость метода определения карбонильных соединений с использованием 2,4-динитрофенилгидразина (ДНФГ) для оценки уровня ПОЛ в модельной системе 61
3.1.3. Сравнительное определение содержания различных продуктов ПОЛ в окисленных липосомах 64
3.2. Оптимизация условий применения модельной системы ПОЛ на основе липосом с Си +-зависимой индукцией окисления 67
3.2.1. Зависимость накопления карбонильных соединений в липосомах от длительности периода окисления и особенностей инициации процесса ПОЛ 67
3.2.2. Влияние концентрации фосфатидилхолина на накопление карбонильных соединений в липосомах в ходе длительно протекающего процесса ПОЛ 74
3.2.3. Возможность использования буферных растворов в модельной системе на основе липосом при Си +-зависимой индукции ПОЛ 77
Глава 4. Оценка особенностей антиоксидантного действия лекарственных препаратов с использованием модельной системы ПОЛ на основе фосфатидилхолиновых липосом 83
4.1. Влияние липофильных антиоксидантов на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомальной модельной системе 83
4.1.1. Особенности влияния липофильных фенольных антиоксидантов на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомах 83
4.1.2. Особенности влияния липофильных соединений, содержащих несколько двойных связей, на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомах 90
4.2. Влияние гидрофильных антиоксидантов на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомальной модельной системе 93
4.2.1. Особенности влияния тиолов на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомах 93
4.2.2. Особенности влияния таурина на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомах 95
4.2.3. Особенности влияния комплексообразующих карбоновых кислот на накопление карбонильных продуктов ПОЛ в липосомах 96
Заключение 101
Выводы 106
Список использованной литературы 108
