Введение
2. Обзор литературы 10
2.1. Общая характеристика лейкоза крупного рогатого скота 10
2.2. Таксономия семейства ретровирусов 12
2.3. Вирус лейкоза крупного рогатого скота 13
2.3.1. Морфология ВЛ КРС 13
2.3.2. Структура генома ВЛ КРС 15
2.3.3. Репликация вируса 18
2.3.4. Устойчивость вируса 19
2.3.5. Культивирование ВЛ КРС 20
2.4. Эпизоотологические особенности лейкоза КРС 22
2.4.1. Естественные пути передачи ВЛ КРС 22
2.4.2. Передача ВЛ КРС в ходе эксперимента 23
2.5. Меры борьбы и профилактики 25
2.6. Диагностика лейкоза КРС 26
2.6.1. Клинические, патоморфологические и гематологические методы исследования лейкоза КРС 26
2.6.2. Серологические реакции 27
2.6.3. Прямые методы выявления провируса ВЛ КРС 32
2.7. Заключение по обзору литературы 38
3. Собственные исследования 40
3.1. Материалы 40
3.1.1. Биологические материалы 40
3.1.2. Реактивы и оборудование 41
3.2. Методы 42
3.3. Результаты собственных исследований и их обсуждение 47
3.3.1. Разработка и усовершенствование метода ПЦР для выявления провирусной ДНК ВЛ КРС
3.3.1.1. Выбор праймеров для проведения ПЦР 48
3.3.1.2. Оптимизация условий пробоподготовки для ПЦР 50
3.3.1.3. Оптимизация условий проведения ПЦР 51
3.3.2. Изучение возможности применения метода ПЦР для обнаружения ВЛ КРС в различных биоматериалах 56
3.3.2.1. Применение метода ПЦР для выявления провирусной ДНК в образцах крови КРС 56
3.3.2.2. Использование метода ПЦР для выявления провирусной ДНК в образцах молока КРС 58
3.3.2.3. Применение метода ПЦР для выявления провируса ВЛ КРС в образцах сыворотки крови КРС 60
3.3.2.4. Обнаружение провирусной ДНК в образцах носовых истечений КРС 61
3.3.2.5. Применение метода ПЦР для выявления провируса лейкоза КРС в суспензиях из органов 64
3.3.2.6. Применение метода ПЦР для выявления провируса лейкоза КРС в образцах спермы быков-производителей 66
3.3.3. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота у КРС и овец, содержащихся совместно в естественных условиях 67
3.3.4. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота методом ПЦР-ИФА 74
4. Заключение 76
5. Выводы 79
6. Практические предложения 80
7. Список использованной литературы 81
Приложения 102
