Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 10
1.1.. Гетерогеноость наследственных форм тугоухости и глухоты 10
1.2. Анатомия и физиология органа корти 20
1.3. Участие коннексинов в процессе звуковосприятия..22
1.4. Гены коннексинов 26 и 30 (gjb 2 и gjb6) 25
1.5. Спектр мутаций в генах gjb2 и gjb6 25
1.6. Мутации в генах митохондриальной днк, обусловливающие нарушение процесса звуковосприятия 29
1.7. Краткие сведения об эпидемиологии наследственной глухоты в республике саха (якутия) 32
ГЛАВА 2. Материал и методы 35
2.1. Объект исследования 35
2.1.1. Группа обследованных больных 35
2.1.2. Популяционная выборка 37
2.2 . Методы исследования 38
2.2.1 Выделение геномной ДНК 38
2.2.2 Методы амплификации и детекции исследуемых локусов 38
2.2.2.1 Исследование мутаций генов GJB2 и GJB6 39
2.2.2.1.1. Анализ мутации 35delG в гене GJB2 39
2.2.2.1.2. Скрининг мутаций 235deIC и 167delT в гене GJB2 39
2.2.2.1.3. Скрининг мутации D(G/56-D13S1830) гена GJB6 40
2.2.2.2. Исследования генов tRNASER и 12SrRNA мтДНК 41
2.2.2.3. SSCP-анализ 45
2.2.2.3.1. Поиск мутаций в гене коннексина 26 (GJB2) 45
2.2.2.3.2. Определение нуклеотидной последовательности 46
2.3 Методы статистического анализа 47
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение
3.1. Анализ спектра и частоты мутаций в гене коннексина 26 (gjb2) у больных наследственной глухотой из республики Саха (Якутия) 50
3.1.1. Анализ мутации 35delG в гене коннексина 26 (GJB2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 50
3.1.2. Скрининг мутации 167delT в гене коннексина 26 (GJB2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 54
3.1.3. Скрининг мутации 235delC в гене GJB2 у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 55
3.1.4. Поиск мутаций в гене коннексина 26 (GJB2) у больных с наследственной глухотой из PC (Я) 57
3.1.4.1. Анализ мутации V37I в гене GJB2 у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 57
3.1.4.2. Анализ мутаций 333-334delAA и 312-326dell4 в гене GJB2 у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 62
3.1.4.3. Анализ мутаций R127H и R98L у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 64
3.1.4.4. Анализ полиморфных вариантов гена коннексина 26 (GJB2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из PC (Я) 67
3.1.5. Спектр и частота идентифицированных мутаций в гене коннексина 26
(GJB2) у больных наследственной несиндромальной глухотой из
Республики Саха (Якутия) 71
3.2. Скрининг делеции d(gjb6-d\3s№0) в гене коннексина 30 (gjb6) у больных наследственной несиндромальной глухотой из рс(я) 75
3.3. Анализ мутаций в генах 12srrna и trnaser митохондриальной днк у больных несиндромальной сенсоневральной глухотой из республики саха (якутия) 77
3.4. Алгоритм днк-диагностики наследственной несиндромальной сенсоневральной глухоты в республике саха (якутия) 81
3.5. Исследование частоты мутаций гена коннексина 26 (gjb2) в некоторых популяциях рс(я) 85
3.5.1. Анализ мутации 35delG в гене коннексина 26 (GJB2) в популяции якутов и русских РС(Я) 85
3.5.2. Анализ мутаций 167delT и 235delC гена коннексина 26 (GJB2) в популяции якутов 91
3.5.3. Анализ мутации V37I гене коннексина 26 (GJB2) в популяции якутов 98
3.5.4. Частота полиморфного варианта V27I в гене коннексина 26 (GJB2) в популяции якутов 101
3.5.5. Анализ мутации a1555g гена 12srrna в популяции якутов 103
3.5.6. Спектр и частота мутаций генов gjb2 и usrrna в популяции якутов 105
Заключение 107
Выводы 113
Список литературы
