Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 4
1.1. Горох 4
1.2. Молекулярные маркеры 6
1.2.1. Белковые маркеры 8
1.2.2. Молекулярные ДНК-маркеры 9
1.2.2.1. ПДРФ-маркеры 9
1.2.2.2. Полимеразная цепная реакция 12
1.2.2.3. МААР-маркеры 14
1.2.2.3.1. RAPD-маркеры 15
1.2.2.3.2. AP-PCR (Arbitrarily Primed PCR) маркеры 18
1.2.2.3.3. DAF-маркеры 18
1.2.2.4. STS-маркеры 19
1.2.2.4.1. SCAR-маркеры 19
1.2.2.4.2. СAPS-маркеры 21
1.2.2.4.3. SSR-маркеры 22
1.2.2.5. ДНК-Маркеры с полупроизвольными праимерами 24
1.2.2.5.1. ISSR-маркеры 24
1.2.2.5.2. AFLP-маркеры 26
1.3. Генетические карты сцепления 27
1.4. Количественные признаки 30
1.4.1. Картирование локусов количественных признаков 30
1.4.2. Методы картирования локусов количественных признаков 33
ГЛАВА 2. Материалы и методы 37
2.1. Исходный материал 37
2.2. Выделение ДНК гороха для ГЩР-анализа 39
2.3. Амплификация ДНК RAPD-методом 40
2.4. Амплификация ДНК ISSR-методом 42
2.5. SCAR-маркеры 42
2.6. AP-PCR-метод 43
2.7. CAPS-маркеры 43
2.7.1. Выделение фрагментов из геля 45
2.7.2. Секвенирование фрагментов 45
2.8. Массовый сегрегационный анализ 45
2.9. Полевые эксперименты 46
2.10. Анализ количественных признаков 47
2.11. Анализ средних значений в ряду поколений 48
2.12. Анализ сцепления 49
2.13. Картирование локусов количественных признаков (QTL) 50
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение 51
3.1. Отбор линий 51
3.2. Выявление молекулярных маркеров в ДНК гороха 51
3.3. Идентификация и локализация гена chill5 и сцепленных с ним ДНК-маркеров 54
3.3.1. Анализ расщепления по морфологическим признакам 54
3.3.2. RAPD- и ISSR-анализ 55
3.3.3. Анализ расщепления с использованием молекулярных маркеров ... 57
3.4. Локализация гена deh с помощью молекулярных маркеров 61
3.5. Картирование SCAR-маркера, сцепленного с геном ха!8 у гороха 65
3.6. Создание генетических карт сцепления гороха 67
3.6.1. Построение генетической карты сцепления для скрещивания (WL1238 х СЫ115) 68
3.6.2. Построение генетической карты сцепления для скрещивания (WL1238* Флагман) 70
3.6.3. Сравнение маркерных локусов в каждой группе сцепления в двух скрещиваниях гороха 75
3.7. Изучение взаимосвязей компонентов урожая гороха 85
3.7. 1. Анализ коэффициентов путей 85
3.7. 2. Анализ средних значений в ряду поколений 88
3.8. Картирование локусов количественных признаков (QTL), контролирующих компоненты урожая у гороха 90
3.8.1. Локализация QTL в скрещивании (WL1238 х СЫН5) 91
3.8.1.1. Локализация QTL высоты 92
3.8.1.2. Локализация QTL, определяющих признак "число бобов" 98
3.8.1.3. Локализация QTL, определяющих признак "число семян" 98
3.8.1.4. Локализация QTL размера семян 100
3.8.1.5. Локализация QTL признака "вес семян" 101
3.8.2. Локализация QTL в скрещивании (WL1238 х Флагман) 103
3.8.2.1. Локализация QTL высоты 103
3.8.2.2. Локализация QTL длины междоузлий 105
3.8.2.3. Локализация QTL числа бобов 107
3.8.2.4. Локализация QTL числа семян 108
3.8.2.5. Локализация QTL размера семян 108
3.8.2.6. Локализация QTL веса семян 109
Заключение 111
Выводы 119
Список литературы 120
