Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 14
1.1 Регенерация печени млекопитающих после частичной гепатэктомии 14
1.2 Влияние объема резекции печени на восстановительный процесс 25
1.3 Роль макрофагов в регенерации 31
1.4 Факультативные пути регенерации печени млекопитающих 35
1.5 Регенеративная медицина заболеваний печени 40
1.5.1 Острая печеночная недостаточность 42
1.5.2 Хроническая печеночная недостаточность 45
1.5.3. Опухоли печени 49
1.5.4 Метаболические нарушения печени 51
1.5.5 Искусственная печень 53
ГЛАВА 2. Материалы и методы 60
2.1 Экспериментальная модель 60
2.2 Трансплантация МСК 61
2.3 Оценка функции печени 61
2.4 Гистологическое исследование 61
2.5 Митотическая активность 62
2.6 Иммуногистохимическое исследование 62
2.6 Вестерн-блот анализ 64
2.7 ИФА-анализ 64
2.8 Оценка клеточной гибели 65
2.9 Полимеразная цепная реакция в реальном времени
2.10 Получение клеточных культур и культивирование МСК пупочного канатика крыс 72
2.11 Подготовка к иммунофенотипированию 72
2.12 Оценка дифференцировочного потенциала 73
2.13 Оценка функционального состояния митохондрий 74
2.14 Статистический анализ 76
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований
3.1 Динамика репаративного процесса в печени после субтотальной резекции у крыс 77
3.1.1 Гистологические изменения регенерирующей печени крыс после субтотальной резекции 77
3.1.2 Выживаемость животных 79
3.1.3 Восстановление массы и функции печени 80
3.2 Пролиферативная активность гепатоцитов печени крыс после субтотальной резекции 83
3.3 Роль клеточной гибели в регенерацию печени крыс после субтотальной резекции 89
3.4.Динамика экспрессии генов регуляторных молекул в печени после субтотальной резекции 94
3.5 Изучение экспрессии генов-регуляторов репаративного процесса печени после субтотальной резекции в легких и почках. 105
3.6 Изучение роли стволовых клеток в регенерации печени после субтотальной резекции 108
3.7 Характеристика системы макрофагов печени крыс после субтотальной резекции 121
3.8 Стимуляция регенерации печени крыс после субтотальной резекции с помощью мультипотентных стромалных клеток (мск) пупочного канатика 128
3.8.1. Характеристика иммунофенотипа и функциональных свойств МСК пупочного канатика лабораторных животных 128
3.8.2 Влияние трансплантации МСК пупочного канатика на выживаемость крыс и пролиферативную активность гепатоцитов после субтотальной резекции печени 134
3.8.3 Изучение миграции, дифференцировки и элиминации трансплантированных МСК пупочного канатика при регенерации печени крыс после субтотальной резекции 138
3.8.4 Влияние трансплантации МСК пупочного канатика на соотношение типов макрофагов в регенерирующей печени крыс после субтотальной резекции 149
3.8.5 Влияние трансплантации МСК пупочного канатика на экспрессию генов регуляторных молекул в регенерирующей печени крыс после субтотальной резекции 151
3.8.7 Влияние трансплантации МСК пупочного канатика на функцию митохондрий клеток печени крыс после субтотальной резекции 155
ГЛАВА 4. Обсуждение полученных результатов 164
Заключение 197
Выводы 200
Список сокращений 202
Список литературы 203
