Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 12
1.1 Роль впч в этиологии рака шейки матки 12
1.2 Профилактика рака шейки матки 14
1.2.1 Вакцинация 14
1.2.2 Скрининг женщин на рак шейки матки 15
1.2.2.1 Классификация цервикальных цитологических поражений 16
1.2.2.2 Скрининговые технологии 19
1.3 Биология вируса папилломы человека 26
1.3.1 Классификация вируса папилломы человека 26
1.3.2 Жизненный цикл вируса папилломы человека 28
1.3.3 Организация генома вируса папилломы человека 29
1.3.4 Роль ранних белков вируса папилломы человека в онкогенной трансформации эпителиальных клеток 31
1.3.5 Молекулярные основы типоспецифических различий в трансформирующей активности вируса папилломы человека 33
1.3.6 Значение интеграции ДНК вируса папилломы человека в геном хозяина для онкогенной трансформации клеток 35
1.4. Факторы риска цервикальнои неопластической прогрессии, ассоциированные с вирусом папилломы человека 37
1.4.1 Инфицирование онкогенными типами и молекулярными вариантами вируса папилломы человека 37
1.4.2 Множественная папилломавирусная инфекция 40
1.4.3 Высокая вирусная нагрузка 40
1.4.4 Персистенция папилломавирусной инфекции 41
1.4.5 Нерегулируемая экспрессия вирусных онкогенов 42
Глава 2. Материалы и методы исследования... 47
2.1 Схема исследования 47
2.2 Клинический материал 48
23 Цитологические исследования! 48
2.4 Выделение нуклеиновых кислот из клинического материала 49
2.5 Полимеразная цепная реакция с типоспецифическими праймерами. 50
2.6 Приготовление компетентных клеток... 51
2.7 Вьщеление плазмидной днк; 53
2.8 . Полимеразная цепная реакция в реальном времени. 54
2.9 Статистическая обработка данных 54
Результаты;собственных исследований. :. ,. ...56
Главa 3: Определение вирусной нагрузки и физического статусавируса папилломы человека. 56
З.г Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени 56
3.2 Методика определения физического статуса днк вирусов папилломычеловека 16 и 18 типов 61
Глава 4 Молекулярные маркеры вируса папилломы человекав ранней диагностике цервиьсальных шоплазий ... 66
4.1 Частота встречаемости онкогенных типов вируса папилломы человека при патологии шейки матки. . -.. ..66
4.2 Оценка вирусной нагрузки у женщин с патологией шейки матки:... ... ...69
4.3 Физический статус днк вируса папилломы человека при различных стадиях заболевания шейки матки ... ...72
4.4 Типоспецифическая персистенция впч 79
Глава 5. Обсуждение результатов 88
Выводы 102
Практические рекомендации 103
Список работ, опубликованных по теме диссертации. 104
Список литературы
