Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературных данных 10
1.1. Требования к физико-химическим методам анализа при определении лекарственных препаратов в биологических жидкостях для клинических исследований 10
1.2. Масс-спектрометрические методы, применяемые при определении лекарственных препаратов в плазме крови 13
1.2.1. Методы ионизации в ВЭЖХ-МС 14
1.2.1.1. Химическая ионизация при атмосферном давлении 14
1.2.1.2. Электроспрей ионизация 16
1.2.2. Виды масс-анализаторов, используемых в ВЭЖХ-МС 18
1.2.2.1. Квадрупольный масс-анализатор 18
1.2.2.2. Ионная ловушка 19
1.2.2.3. Времяпролетный масс-анализатор 20
1.2.3. Тандемная масс-спектрометрия (MC)n 21
1.3. Матричный эффект в масс-спектрометрии и способы его устранения 25
1.3.1. Оценка матричного эффекта 28
1.3.2. Способы снижения и устранения матричного эффекта 30
1.3.2.1. Вы бор способа пробоподготовки биообъектов к анализу 30
1.3.2.2. Выбор масс-спектрометрических условий 34
1.3.3.1. Использование внутреннего стандарта для устранения матричного эффекта
1.4. Пробоподготовка плазмы крови к ВЭЖХ-МС анализу при определении лекарственных препаратов 38
1.4.1. Осаждение белков 40
1.4.2. Жидкостно-жидкостная экстракц ия 42
1.4.3. Сорбционное концентрирование (твердофазная экстракция) 44
1.4.3.1. Общие сведения о сорбционном концентрировании 44
1.4.3.2. Использование сверхсшитого полистирола при сорбционном концентрировании 47
1.4.4. Последние достижения в области пробоподготовки плазмы крови к анализу при определении лекарственных препаратов 48
I.5. Валидация методик определения лекарственных препаратов в плазме крови 52
1.5.1. Понятие валидации 52
1.5.2. Валидационные критерии, предъявляемые к методикам определения лекарственных препаратов в плазме крови 53
1.5.2.1. Селективность определения 54
1.5.2.2. Нижний предел количественного определения 54
1.5.2.3. Линейный диапазон 55
1.5.2.4. Правильность 56
1.5.2.5. Повторяемость 57
1.5.2.6. Матричный эффект 58
1.5.2.7. Стабильность аналитов 58
ГЛАВА II. Общая характеристика объектов и методов исследования 61
11.1. Аппаратура 61
11.2. Реагенты 63
11.3. Приготовление стандартных растворов аналитов 64
11.4. Приготовление вспомогательных растворов 66
11.5. Характеристика анализируемого объекта 68
11.6. Пробоподготовка плазмы крови к анализу 69
11.6.1. Пробоподготовка плазмы крови при определении цисплатина 69
11.6.2. Пробоподготовка плазмы крови при определении силденафила 69
11.6.3. Пробоподготовка плазмы крови при определении циклосерина 70
11.6.4. Пробоподготовка плазмы крови при определении ропинирола 70
11.6.5. Пробоподготовка плазмы крови при определении капецитабина и 5-фторурацила 71
11.7. Условия хроматографического и масс-спектрометрического определения аналитов 71
11.7.1. ВЭЖХ-МС условия определения цисплатина 71
11.7.2. ВЭЖХ-МС/МС условия определения силденафила 73
11.7.3. ВЭЖХ-МС/МС условия определения циклосерина 74
11.7.4. ВЭЖХ-МС/МС условия определения ропинирола 76
11.7.5. ВЭЖХ-МС/МС условия определения капецитабина и
5-фторурацила 77
11.8. Валидационные характеристики методов 80
11.9. Клинические исследования, выполненные с применением разработанных методик 85
ГЛАВА III. Выявление и устранение матричных эффектов, приводящих к неудовлетворительной сходимости результатов анализа 87
111.1. Матричный эффект при определении цисплатина в плазме крови 87
111.2. Матричное влияние при определении силденафила в плазме крови 101
III.3. Матричные эффекты при определении капецитабина и 5-фторурацила в плазме крови 108
ГЛАВА IV. Выявление и нивелирование матричного влияния, вызывающего нарушение линейности градуировочной зависимости 111
IV.1. Матричный эффект при определении циклосерина в плазме крови 111
IV.2.Матричное влияние при определении ропинирола в плазме крови 119
ГЛАВА V. Практическая реализация найденных методических решений при проведении клинических исследований 123
V.1. Исследование общей токсичности при проведении изолированной перфузии легкого раствором цисплатина 123
V.2. Исследования сравнительной фармакокинетики и биоэквивалентности при пероральном приеме 124
Заключение 127
Принятые сокращения 129
Используемые биомедицинские термины 131
Список литературы 132
Приложение 150
