Введение
2. Обзор литературы 8
2.1. Зоны физиологического действия неблагоприятных факторов... 8
2.2. Белки теплового шока (шапероны) как факторы защиты полипептидов 10
2.2.1. Изменения, происходящие с полипептидами в стрессовых условиях 10
2.2.2. Высокомолекулярные бтш и их защитная роль 16
2.2.3.Низкомолекулярные стрессовые белки - факторы защиты полипептидов от теплового шока и водного дефицита 17
2.2.3.1. Классификация и структурные особенности низкомолекулярных бтш растений 17
2.2.3.2. Регуляция экспрессии генов низкомолекулярных БТШ растений. 24
2.2.3.3. Функции и механизм действия низкомолекулярных бтш растений 26
2.2.3.4. Синтез низкомолекулярных бтш в ответ на тепловой стресс 33
2.2.3.4. Синтез низкомолекулярных бтш в ответ на водный дефицит 36
2.3. Краткая характеристика митохондрий растений 40
2.3.1. Дыхательная система растительных митохондрий и окислительное фосфорилирование 42
2.4. Влияние теплового шока и водного дефицита на дыхание растений 46
2.4.1. Влияние температуры на дыхание растений 46
2.4.2. Особенности дыхания растений в условиях водного дефицита 51
2.4.2.1. Функции и формы воды в растении 51
2.4.2.2. Экологические группы растений по отношению к водному режиму 54
2.4.2.3. Влияние водного дефицита на дыхание 56
2.5. Основные выводы из обзора литературы 63
2.6. Цель и задачи исследования 65
4. Материалы и методы 66
4.1. Подготовка растительного материала 66
4.2. Температурная обработка 66
4.3. Создание условий водного дефицита 67
4.5. Определение выживаемости проростков 68
4.6. Оценка оводыенности тканей проростков 68
4.7. Выделение суммарного клеточного белка 68
4.8. Определение концентрации белка 69
4.9. Выделение митохондрий 70
4.10. Очистка митохондрий 71
4.11. Обработка митохондрий проназой 72
4.12. Обработка митохондрий детергентами 72
4.13. Экстракция митохондриального белка 73
4.14. Определение энергетической активности митохондрий 73
4.15. Электрофорез 74
4.16. Иммуноблоттинг и иммунодетекция 75
4.17. Использованные антитела 76
4.18. Определение молекулярных масс полипептидов 77
4.19. Статистическая обработка 77
5. Результаты и обсуждение 78
5.1. Влияние термической обработки проростков кукурузы, пшеницы И ржи на дыхательную активность изолированных митохондрий 78
5.2. Влияние температуры проращивания на дыхательную активность изолированных митохондрий из проростков кукурузы 81
5.3. Накопление низкомолекулярных бтш во фракции суммарного Клеточного белка из проростков кукурузы, пшеницы и ржи под Действием теплового шока 83
5.4. Накопление низкомолекулярных бтш в митохондриях кукурузы, пшеницы и ржи из проростков, обработанных высокой температурой 86
5.5. Локализация низкомолекулярных бтш на поверхности или Внутри митохондрий 89
5.6.Определение прочности связывания митохондриальных Низкомолекулярных бтш с мембранами 91
5.7. Присутствие низкомолекулярных бтш в различных клеточных фракциях 93
5.8. Действие водного дефицита и обработки осмотиком на накопление низкомолекулярных бтш в проростках кукурузы 97
5.9. Действие водного дефицита и обработки осмотиком на оводненность проростков кукурузы 102
5.10. Действие водного дефицита на выживаемость проростков кукурузы 105
5.11. Дыхательная активность митохондрий, выделенных из проростков, подвергнутых водному дефициту. 107
6. Заключение 121
7. Выводы 125
8. Список использованной литературы
