Введение
Глава 1. Обзор литературы 12
1.1 Липоксигеназное окисление жирных кислот 12
1.1.1 Липоксигеназы 13
1.1.2 Структурные особенности липоксигеназ 13
1.1 .3 Основные свойства липоксигеназ 14
1.1.3.1 Региоспецифичность 14
1.1.3.2 Оптическая и геометрическая специфичность 16
1.1.4 Механизм липоксигеназного окисления жирных кислот 16
1.1.5 Двойное диоксигенирование 17
1.1.6 Функциональное значение продуктов липоксигеназного окисления жирных кислот 19
1.2 Алленоксидсинтаза 21
1.2.1 Механизмы образования кетолов 22
1.2.2 Механизмы биосинтеза циклопентенонов 24
1.2.3 Вторичные превращения кетолов и циклопентенонов 27
1.2.4 Физиологическое значение продуктов алленоксидсинтазного пути28
1.3 Гидропероксидлиаза 32
1.3.1 Клонирование фермента и субстратная специфичность 32
1.3.2 Механизм действия ГПЛ 33
1.3.3 Распространенность и субклеточная локализация 36
1.3.4 Продукты ГПЛ и их физиологическая важность 36
1.4 Дивинилэфирсинтаза 39
1.4.1 Распространенность дивиниловых эфиров 39
1.4.2 Биосинтез дивиниловых эфиров 41
1.4.3 Механизм действия ДЭС 43
1.4.4 Биогенетическое происхождение ДЭС 46
1.4.5 Геометрическая изомерия дивиниловых эфиров 46
1.4.6 Физиологическая важность дивиниловых эфиров 47
1.5 Пероксигеназа 50
1.6 Оксилипинсодержащие сложные липиды 53
1.6.1 Эстолиды и тривернолины 53
1.6.2 Арабидопсиды 56
1.6.3 Фосфолипиды, содержащие дивиниловые эфиры 60
Глава 2. Материалы и методы исследования 61
2.1 Материалы 61
2.2 Инкубация бесклеточного препарата листьев и корней льна с линолевой кислотой, 13 -ГПО Д исЗ-окса-13 -ГПОТ 61
2.3 Экстракция, предварительная очистка и дериватизация продуктов инкубации 62
2.4 Анализ и разделение продуктов 62
2.5 Получение липидного экстракта 62
2.6 Фракционирование липидного экстракта методом колоночной хроматографии 63
2.7 Тонкослойная хроматография 63
2.8 Высокоэффективная жидкостная хроматография 63
2.9 Определение положения заместителей в глицериновом остатке молекул линолипинов 64
2.10 Возрастная зависимость содержания линолипинов в листьях льна 65
2.11 Инфицирование растений льна фитопатогенной бактерией Pectobacterium atrosepticum 65
2.12 Влияние метилового эфира (со52)-этероленовой кислоты и (2Е)-гексеналя на прорастание семян льна 65
2.13 Выделение гексеналя листьями льна 66
2.14 Спектральные исследования 66
Глава 3. Результаты и их обсуждение 68
3.1 Биосинтез оксилипинов in vitro в гомогенате листьев льна 68
3.1.1 Изучение направленности метаболизма линолевой кислоты в листьях льна 68
3.1.2 Идентификация соединения 1 68
3.1.3 Идентификация соединения 2 69
3.1.4 Идентификация соединения 3 74
3.2 Биосинтез оксилпинов in vitro в гомогенате корней льна 76
3.3 Обнаружение линолипинов 76
3.3.1 Изучение состава липидного экстракта листьев льна 76
3.3.2 Идентификация соединения 10, линолипина А 79
3.3.3 Идентификация соединения 12, линолипина В 90
3.3.4 Идентификация соединения 11, линолипина С 92
3.3.5 Идентификация содинения 13, линолипина D 94
3.4. Влияние однократного цикла замораживания - оттаивания на галактолипидный профиль листьев льна 96
3.5 Возрастная зависимость содержания линолипинов в листьях льна 98
3.6 Влияние метилового эфира (со52)-этероленовой кислоты и (2Е)-гексеналя на прорастание семян льна 99
3.7 Влияние инфицирования на содержание линолипинов 100
3.8 Деградация (co5Z)-этероленовой кислоты и линолипинов 100
Заключение 108
Выводы 110
Список литературы 112
