Введение
I. Обзор литературы.
1. Характеристика энтеровирусов 9
2. Энтеровирусы в патологии человека 24
3. Методы лабораторной диагностики энтеровирусных инфекций... 36
II. Материалы и методы.
2.1. Нуклеотидные последовательности геномных РНК пикорнавирусов 45
2.2. Штаммы вирусов 45
2.3. Исследуемый материал 48
2.4. Приготовление воды, свободной от РНКаз 48
2.5. Экстракция РНК энтеровирусов 48
2.6. Олигонуклеотидные праймеры 49
2.7. Постановка реакции обратной транскрипции 49
2.8. Постановка полимеразной цепной реакции (ПЦР) 50
2.9. Электрофорез ДНК 50
2.10. Анализ кДНК энтеровирусов методом ПДРФ 51
2.11. Постановка SSCP 51
2.12. Статистический анализ результатов 52
III. Результаты исследований и их обсуждение.
3..1. Унификация метода ОТ-ПЦР для выявления и дифференциации энтеровирусов человека.
3. 1.1. Сравнительный анализ 5-НТР генома энтеровирусов... 53
3. 1.2. Оценка специфичности разработанных вариантов ПЦР 60
3.1.3. Оценка метода солевой очистки биопроб 63
3.2. ПЦР-ПДРФ анализ 5-НТР генома энтеровирусов человека .
3.2.1. Разработка схемы ПДРФ - дифференциации энтеровирусов 66
3.2.2. Типирование изолятов энтеровирусов методом ПДРФ 79
3.3. SSCP-анализ кДНК 5 -НТР генома энтеровирусов 84
3. 4. Характеристика особенностей циркуляции нейротропных энтеровирусов среди населения Нижнего Новгорода в 1999-2002 гг 93
3.4.1. Обнаружение энтеровирусов у больных с нейроинфекцией 93
3.4.2. Характеристика энтеровирусных серозных менингитов в Нижнем Новгороде 98
Заключение 105
Выводы 117
Список литературы 118
