Введение
2. Обзор литературы 7
2.1. Строение кожи человека 7
2.2. Дифференцировка кератиноцитов 9
2.3. Маркеры стволовых клеток кожи 14
2.4. Белки базальной мембраны 17
2.5. Рецепторы кератиноцитов к белкам ВКМ 21
2.6. Влияние белков ВКМ на культивируемые кератиноциты 25
2.7. Методы выявления стволовых клеток для последующего обогащения ими культуры кератиноцитов 28
Цель и задачи исследования 31
Положения, выносимые на защиту 31
3. Материалы и методы 33
3.1. Выделение и культивирование кератиноцитов 33
3.2. Стриппинг многослойного пласта кератиноцитов и снятие клеток базального слоя 34
3.3. Субстраты 34
3.4. Схема селективной адгезии 35
3.5. Определение числа прикрепившихся к субстрату кератиноцитов 36
3.6. Получение и истощение иммуносывороток ИСб и ИСД 36
3.7. Обработка стекол для приготовления препаратов 38
3.8. Иммунофлуоресцентный анализ 38
3.9. Анализ изображений клеток 40
4. Результаты 43
4. 1. Взаимодействие свежевыделенных и культивируемых базальных
кератиноцитов с разными белками внеклеточного матрикса 43
4.2. Зависимость морфометрических параметров гетерогенной популяции кератиноцитов от времени адгезии к белкам внеклеточного матрикса 51
4.3. Распределение маркеров стволовых клеток кожи (рбЗ, КІ67, К19) в гетерогенной популяции кератиноцитов 65
4.4. Получение кроличьих антител к дифференцированным и недифференцированным кератиноцитам 74
4.5. Выявление субпопуляций кератиноцитов, окрашиваемых полученными антителами ИСб и ИСД 77
Обсуждение 81
Выводы 99
Список литературы 100
