Введение
1 Обзор литературы 13
1.1 Современная концепция окислительного стресса 13
1.1.1 Свободнорадикальные процессы 13
1.1.2 Роль окислительного стресса в развитии воспалительных процессов и старения 23
1.2 Антиоксиданты с потенциальным системным эффектом. 27
1.2.1 Каротиноиды 30
1.2.2 Экранированные фенолы 38
1.2.3 Липофильные катионы 42
1.2.4 Олигопептиды 44
1.2.5 Бактериальные пробиотические препараты 46
2 Материалы и методы исследования 50
2.1 Материалы исследования 50
2.1.1 Биосенсорные штаммы 51
2.1.2 Индукторы окислительного стресса 54
2.1.3 Потенциальные протекторы. 57
2.1.4 Экспериментальные животные 60
2.2 Методы исследования 62
2.2.1 Энзимологические исследования и тесты in vitro. 62
2.2.2 Биолюминесцентный тест 64
2.2.3 Культивирование Deinococcus radiodurans 66
2.2.4 Определение концентрации каротиноидов Deinococcus radiodurans 68
2.2.5 Тест на антимутагенную активность. 68
2.2.6 Работа с экспериментальными животными 69
2.3 Статистическая обработка данных и достоверность результатов 77
3 Результаты 78
3.1 Изучение антиоксидантной и ДНК-протекторной активностей ряда соединений в биолюминесцентном тесте 78
3.1.1 Определение эффективных нелетальных доз прооксидантов и оптимальной плотности культуры для системы биосенсоров . 78
3.1.2 Сравнительный анализ результатов биохимического теста на активность каталазы и уровня экспресии Kat-оперона в клетках биосенсорного штамма E.coli MG 1655 (pKatG-lux) 78
3.1.3 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности контрольных соединений: тролокс, аскорбат, -токоферол 79
3.1.4 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности липофильных катионов 81
3.1.5 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности олигопептидов 84
3.1.6 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности бактериальных пробиотических препаратов 93
3.2 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности потенциальных адаптогенов в биолюминесцентном тесте 95
3.2.1 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности экранированных фенолов 95
3.2.2 Антиоксидантная и ДНК-протекторная активности каротиноидов Deinococcus radiodurans 108
3.3 Оптимизация параметров культивирования Deinococcus radiodurans для экстракции каротиноидов. 116
3.4 Изучение антимутагенной активности каротиноидов D.radiodurans. 117
3.5 Изучение влияния каротиноидов Deinococcus radiodurans на динамику заживления ран у млекопитающих 118 3.5.1 Динамика уровня глюкозы в крови мышей CD-I при моделировании стрептозоцинового сахарного диабета и на фоне перорального введения каротиноидов 118
3.5.2 Анализ данных планиметрических исследований влияния каротиноидов в модели механической раны на фоне сахарного диабета I типа 121
3.5.3 Анализ спонтанной и металл-катализируемой деструкции белков сыворотки крови мышей CD-I при моделировании стрептозоцинового сахарного диабета и на фоне введения каротиноидов 127
4 Обсуждение полученных результатов 129
Выводы 146
Список использованных источников
