Введение
1 Обзор литературы 12
1.1 Предпосылки получения удвоенных гаплоидов в культуре микроспор рода Brassica 12
1.2 Влияние генотипа на формирование эмбриоидов в культуре микроспор 13
1.3 Подготовка растений-доноров микроспор 15
1.4 Стадия развития культивируемых микроспор 16
1.5 Маркерные признаки перехода микроспор от гаметофитного пути развития к спорофитному 17
1.6 Активация перехода к спорофитному пути развития 18
1.6.1 Тепловой и холодовой шок 18
1.6.2 Углеводное голодание 19
1.6.2.1 Альтернативные источники углеводного питания 19
1.6.2.2 Влияние уровня рН среды на эмбриогенез в культуре микроспор 20
1.7 Использование буфера для стабилизации уровня рН 20
1.8 Использование гуммиарабики для увеличения выхода эмбриоидов 21
1.9 Использование антиокислителей 22
1.10 Формирование эмбриоидов 23
1.11 Формирование растений из эмбриоидов 23
1.12 Спонтанное удвоение числа хромосом 25
1.13 Удвоенные гаплоиды в селекции и генетике растений 26
1.14 Особенности линий удвоенных гаплоидов 28
1.15 Состояние и перспективы селекции раннеспелой белокочанной капусты 29
1.16 Биологические особенности капусты белокочанной 32
1.17 Цитоплазматическая мужская стерильность у капустных культур 34
1.18 Комбинационная способность раннеспелой белокочанной капусты 35
1.19 Особенности наследования признаков капусты белокочанной 37
2 Материалы и методы 40
2.1 Создание удвоенных гаплоидов 40
2.1.1 Растительный материал 40
2.1.2 Условия выращивания и подготовки растений – доноров 40
2.1.3 Определение стадии развития микроспор 41
2.1.4 Выделение и культивирование микроспор, получение эмбриоидов 42
2.1.5 Факторы, влияющие на эмбриогенез культивируемых микроспор 43
2.1.6 Регенерация/проращивание эмбриоидов 45
2.1.7 Укоренение и адаптация сеянцев и проростков в субстрате 45
2.1.8 Определение плоидности растений-регенерантов 46
2.2 Оценка хозяйственно-ценных признаков линий УГ и выделение перспективных гибридных комбинаций 47
2.2.1 Растительный материал 47
2.2.2 Размножение удвоенных гаплоидов 48
2.2.3 Оценка степени проявления самонесовместимости 49
2.2.4 Полевые испытания гибридных комбинаций. Выделение перспективных гибридных комбинаций 49
2.2.5 Условия проведения полевых испытаний 50
2.2.5.1 Характеристика почвы опытного участка 50
2.2.5.2 Температура воздуха в период вегетации 50
2.2.5.3 Атмосферные осадки в период вегетации 51
2.3 Статистическая обработка 52
3 Результаты и обсуждение 54
3.1 Влияние генотипа донорного растения на формирование и выход эмбриоидов в культуре изолированных микроспор Brassica oleracea L. var. capitata 54
3.2 Изучение влияния различных факторов на частоту эмбриогенеза в культуре микроспор 74
3.2.1 Влияние рН среды на эмбриогенез в культуре микроспор 74
3.2.2 Влияние MES и гуммиарабики на эмбриогенез капусты белокочанной 78
3.2.3 Влияние базовой концентрации питательной среды NLN-13 на эмбриогенез в культуре микроспор 81
3.2.4 Влияние концентрации макроэлементов в питательной среде на эмбриогенез в культуре микроспор 83
3.2.5 Влияние высокого рН среды (8,0) и теплового шока на эмбриогенез в культуре микроспор 3.3 Особенности интеграции технологии культуры изолированных микроспор в селекционный процесс у капусты белокочанной 88
3.4 Изучение проявления хозяйственно-ценных признаков УГ и ЛУГ 93
3.5 Анализ комбинационной способности линий УГ по признаку «скороспелость» 99
3.5.1 Анализ ОКС ЛУГ в системе топкросс 99
3.5.2 Анализ комбинационной способности линий УГ по признаку «скороспелость» в системе диаллельных скрещиваний 100
3.6 Оценка комбинационной способности линий по признаку «масса кочана» 106
3.6.1 Оценка общей комбинационной способности (ОКС) в системе топкросс, 2015- 2016 гг 106
3.6.2 Анализ комбинационной способности линий УГ в системе диаллельных скрещиваний 107
3.7 Оценка и выделение перспективных гибридных комбинаций, 2015 г.113
3.8 Оценка и выделение перспективных гибридных комбинаций, 2016 г.116
Заключение 118
Выводы 118
Рекомендации производству 121
Список сокращений 122
Библиографический список 123
Приложения 144
