Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 11
1.1. Биологические и генетические механизмы жизненного цикла вирусов как основа для выбора перспективных направлений антивирусной химиотерапии 11
1.1.1. Молекулярно-генетическая организация вирусов и реализация вирусной генетической информации. Ингибиторы вирусных ферментов 11
1.1.2. Механизмы взаимодействия вируса и клетки-хозяина и ингибиторы ключевых этапов вирусной инфекции 20
1.2. Характеристические особенности фуллеренов и перспективность их применения в биологии и медицине 32
1.2.1. Строение фуллеренов 32
1.2.2. Химические свойства фуллеренов 35
1.2.3. Воздействие фуллеренов на биологические объекты 45
1.2.3.1. Биохимическая активность фуллеренов 45
1.2.3.2. Антивирусная активность фуллеренов 49
1.2.3.3. Действие фуллеренов на клетки и их цитотоксические свойства 53
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 58
2.1. Синтез водорастворимых производных фуллеренов 58
2.2. Клеточные культуры и вирусы 60
2.3. Определение влияния производных фуллеренов на культуры соматических клеток 62
2.3.1. Цитотоксический эффект 62
2.3.2. Исключение трипанового синего 62
2.3.2.1. Приготовление раствора трипанового синего 62
2.3.3. Гемолитический тест 63
2.3.4. Анализ роста бактерий в периодической культуре 64
2.4. Исследование вирулицидного действия производных фуллеренов . 65
2.4.1. Действие на внеклеточный вирус гриппа 65
2.4.2. Действие на внеклеточный вирус полиомиелита 67
2.4.3. Фагоцидное действие 68
2.5. Изучение влияния производных фуллеренов на процесс репродукции вирусов 69
2.5.1. Исследование репродукции вируса гриппа 69
2.5.1.1. Метод ИФА 70
2.5.1.1.1. Приготовление желатины 72
2.5.2. Изучение адсорбции вирусов полиомиелита на клетках НЕр 2 . 72
2.5.3. Изучение влияния производных фуллеренов на адсорбированный вирус полиомиелита 73
2.6. Изучение адсорбции бактериофага /52 на чувствительной культуре 74
2.6.1. Подготовка бактериальной культуры 75
2.7. Изучение длительности латентного периода бактериофага /52 в культуре Escherichia coli С 75
2.8. Электронная микроскопия 77
2.8.1. Подготовка материала для электронной микроскопии 77
2.8.1.1. Приготовление смолы 78
2.9. ИК спектроскопия 78
2.10. Статистическая обработка результатов 78
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований 80
3.1. Характеристика производных фуллеренов 80
3.2. Исследование токсичности производных фуллеренов в отношении клеточных линий MDCK, НЕр2 и эритроцитов крови человека . 83
3.2.1. Гемотоксичность производных фуллеренов 83
3.2.2. Цитотоксичность производных фуллеренов в отношении клеток MDCK 87
3.2.3. Действие производных фуллеренов на культуру клеток НЕр2 92
3.2.4. Биологическая активность производных фуллеренов в отношении культуры бактериальных клеток Escherichia coli С 97
3.3. Исследование биологического действия водорастворимых производных фуллеренов на вирусы человека на модели вирус гриппа А/Виктория/3 5/72 (НЗЫ2)-клетки MDCK 107
3.3.1. Влияние водорастворимых производных фуллеренов на внеклеточный вирус гриппа А/Виктория/3 5/72 (H3N2) 107
3.3.2. Воздействие производных фуллеренов на процесс репродукции вируса гриппа А/Викгория/35/72 (H3N2) в культуре клеток MDCK 116
3.4. Исследование влияния производных фуллеренов на вирусы человека на модели вирус полиомиелита-клетки НЕр2 120
3.4.1. Эффект производных фуллеренов на внеклеточный вирус полиомиелита Р712, ch2ab (II) 120
3.4.2. Влияние производных фуллеренов на инфекционный процесс в системе полиовирус -клетки НЕр2 122
3.5. Влияние производных фуллеренов на биологическую систему бактериофаг (52 - Escherichia coli С 128
3.5.1. Действие производных фуллеренов на внеклеточный бактериофаг (52 128
3.5.2. Влияние производных фуллеренов на процесс адсорбции бактериофага (52 на клетках Escherichia coli С 129
3.5.3. Изменение длительности латентного периода и урожая бактериофага (52 в клетках Escherichia coli С в присутствии производных фуллеренов 135
Заключение 140
Выводы 153
Список цитируемой литературы 155
Приложения 172
