Введение
ГЛАВА 1 Криптококк и криптококкоз 11
1.1 Характеристика комплекса видов Cryptococcus neoformans / Cryptococcus gattii 11
1.2 Патогенность криптококков 16
1.2.1 Основные факторы патогенности С. neoformans и С. gattii 16
1.2.2 Другие факторы патогенности С. neoformans 20
1.3 Клинические варианты и факторы риска развития криптококкоза 23
ГЛАВА 2 Штаммы С. neoformans и врожденный иммунный ответ 26
2.1 Взаимодействие С. neoformans с макрофагами 26
2.1.1 Паттерн-распознающие рецепторы 26
2.1.1.1 Маннозный рецептор 27
2.1.1.2 Дектин-1 29
2.1.1.3 Toll-рецепторы 31
2.2 Роль опсонинов в иммунном ответе при криптококкозе 32
2.2.1 Компоненты комплемента 32
2.2.2 Антитела 33
2.3 Факторы микробоцидности макрофагов 34
2.3.1 Кислородзависимые факторы микробоцидности 34
2.3.1.1 Образование активных продуктов кислорода 34
2.3.1.2 Реактивные промежуточные продукты азота 36
2.3.2 Кислороднезависимые факторы микробоцидности 37
2.4 Медиаторы иммунного ответа 38
2.5 Резистентность к антифунгальным препаратам при криптококковой инфекции з
Экспериментальная часть
ГЛАВА 3 Объекты и методы исследования 46
3.1 Объекты исследования 46
3.1.1 Штаммы Cryptococcus neoformans 46
3.1.2 Экспериментальные животные 47
3.2 Методы исследования 48
3.2.1 Морфология культур С. neoformans 48
3.2.2 Видовая идентификация Cryptococcus neoformans 48
3.2.3 Определение вирулентности криптококков на лабораторных животных 50
3.2.4 Определение фенолоксидазной активности С. neoformans 51
3.2.5 Получение перитонеальных макрофагов и культивирование их in vitro 51
3.2.6 Определение фагоцитарной активности макрофагов 52
3.2.7 Методы определения факторов микробоцидности 53
3.2.7.1 Продукция нитроксид анионов 53
3.2.7.2 Продукция супероксид анионов в тесте с нитросиним тетразолием 54
3.2.8 Определение уровня продукции цитокинов макрофагами 55
3.2.9 Определение цитотоксической активности перитонеальных макрофагов 56
3.2.10 Методы определения чувствительности С. neoformans к антифунгальным агентам различного происхождения 56
3.2.10.1 Определение чувствительности С. neoformans к флуконазолу и вориконазолу (CLSIМ44-А) 56
3.2.10.2 Определение чувствительности к протегринам методом серийных разведений 58
3.2.11 Методы статистического анализа полученных данных 59
ГЛАВА 4 Морфо-биологическая характеристика штаммов С. neoformans 61
4.1 Происхождение изолятов С. neoformans 61
4.2 Морфологическая и биологическая характеристика клинических изолятов С. neoformans 64
4.3 Определение патогенности криптококков на экспериментальных животных 68
ГЛАВА 5 Взаимодействие штаммов C.neoformans разной вирулентности с перитонеальными макрофагами in vitro 71
5.1 Фагоцитарная активность макрофагов в отношении С. neoformans 71
5.2 Влияние штаммов С. neoformans разной вирулентности на продукцию факторов микробоцидности перитонеальными макрофагами 77
5.2.1 Влияние штаммов С. neoformans разной вирулентности на способность макрофагов к продукции супероксиданионов in vitro. 11
5.2.2 Влияние штаммов С. neoformans на способность макрофагов продуцировать нитроксидные радикалы in vitro 78
5.3 Определение цитотоксической активности макрофагов по отношению к штаммам С. neoformans разной вирулентности 82
5.4 Оценка спектра цитокинов, вырабатываемых макрофагами, при взаимодействии с криптококками in vitro 84
5.5 Чувствительность штаммов С. neoformans разной вирулентности к азоловым препаратам и антимикробным пептидам животного происхождения 89
ГЛАВА 6 Заключение 94
Выводы 108
Практические рекомендации 109
Перспективы дальнейшей разработки темы 109
Список литературы по
