Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Глюкокортикоиды и их механизмы действия на экспрессию гормон зависимых генов 15
1.1.1. Общие функции глюкокортикоидов 15
1.1.2. Экспрессия глюкокортикоидных рецепторов в головном мозге 20
1.1.3. Механизмы действия глюкокортикоидов
1.1.3.1. Структура глюкокортикодного рецептора 22
1.1.3.2. Канонический механизм действия глюкокортикоидов 25
1.1.3.3. Механизм быстрых негеномных эффектов глюкокортикоидов 28
1.1.3.4. Неканонический механизм действия глюкокортикоидов за счет белок-белкового взаимодействия 32
1.2. Особенности структуры AP-1 комплекса, входящих в его состав белков, их экспрессия 33
1.2.2. Экспрессия генов раннего ответа семейств Jun и Fos 37
1.3. Тирозингидроксилаза мозга и ее регуляция глюкокортикоидами 40
1.3.1. Тирозингидроксилаза: ген, белок, локализация 40
1.3.2. Экспрессия тирозингидроксилазы в онтогенезе 42
1.3.3. Регуляция экспрессии тирозингидроксилазы 44
1.3.4.Регуляция экспрессии тирозингидроксилазы глюкокортикоидами 47
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Животные 51
2.2. Экспериментальные воздействия 51
2.3. Забор материала 52
2.4. Выделение РНК 53
2.5. Получение кДНК 53
2.6. Определение уровня мРНК генов ТГ, c-fos, fosB, c-jun, junB, junD методом ПЦР в реальном времени (realime PCR) с использованием технологии TaqMan 54
2.7. Иммуногистохимическое окрашивание срезов головного мозга 55
2.8. Иммунопреципитация хроматина (ChIP) 57
2.9. Статистическая обработка результатов 61
Глава 3. Результаты 62
3.1. Соотношение уровней мРНК и белков семейств Jun и Fos в раннем онтогенезе 62
3.1.1. Динамика экспрессии генов Jun/Fos в перинатальном онтогенезе 62
3.1.2. Соотношение уровня мРНК генов семейства Jun к Fos 63
3.1.3. Соотношение экспрессии белков JunB и с-Fos в раннем онтогенезе
3.2. Действие глюкокортикоидов на уровень мРНК ТГ в стволе мозга трехдневных крысят 67
3.3. Влияние глюкокортикоидов на экспрессию генов раннего ответа c-fos и c-jun в отделах неонатального мозга 68
3.4. Взаимодействие белков АР-1 комплекса с дистальным АР-1 элементом промотора ТГ при введении дексаметазона в раннем постнатальном онтогенезе 73
3.5. Экспрессия гена и белка ТГ после введения дексаметазона на третий день жизни
Глава 4. Обсуждение 79
Выводы 91
Библиография
