Введение
ГЛАВА 1 Обзор литературы 10
1.1 Репарация миокарда после инфаркта 10
1.2 Ангиогенез и его роль в восстановлении постинфарктного миокарда 14
1.2.1 Васкулогенез, ангиогенез. Артериогенез 14
1.2.2. Регуляция ангиогенеза 17
1.2.3 Терапевтический ангиогенез 21
1.3. Липосомы как средство доставки биологически активных веществ 24
1.3.1. Общая характеристика липосомальных препаратов 24
1.3.2. Перспективы и преимущества применения липосомальных форм
препаратов 26
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 30
2.1. Терапевтические агенты, используемые в работе 30
2.2. Проведение экспериментов in vitro 32
2.2.1. Подготовка клеточного материала 32
2.2.2. Оценка жизнеспособности клеток после культивирования с липосомами в неблагоприятных условиях 33
2.2.3. Оценка взаимодействия культуры клеток с липосомами различного типа34
2.3. Проведение экспериментов in vivo 35
2.3.1. Моделирование инфаркта миокарда 35
2.3.2. Группы исследования и схема эксперимента.. 36
2.3.3. Оценка органного распределения липосом 37
2.3.4. Гистологическое исследование миокарда 37
2.3.5. Оценка васкуляризации миокарда 38
2.3.6. Оценка экспрессии сосудисто-эндотелиального ростового фактора в миокарде 38
2.3.7. Анализ апоптоза кардиомиоцитов методом TUNEL 39
2.3.8. Иммуноферментный анализ 40
2.4. Статистическая обработка результатов 42
ГЛАВА 3. Оценка in vitro эффективности применения липосомальных препаратов 43
3.1. Оценка взаимодействия клеток с липосомами различного состава 43
3.2. Протективный эффект липосом в условиях сывороточной депривации 47
ГЛАВА 4. Сравнительная оценка способов доставки липосомальной формы VEGF 51
ГЛАВА 5. Сравнительная оценка эффективности применения липосомальных препаратов после инфаркта миокарда 57
5.1. Оценка экспрессии VEGF в образцах миокарда крыс 57
5.2. Анализ содержания VEGF в сыворотке крови крыс 60
5.3. Васкуляризация миокарда после введения препаратов VEGF 63
5.4. Оценка содержания белка, связывающего жирные кислоты, в сыворотке крови крыс 67
5.5. Гистологическая оценка морфологических изменений миокарда крыс после введения VEGF 70
5.6. Оценка выраженности апоптоза в миокарде крыс после введения VEGF 74
5.7. Содержание некоторых про- и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови крыс 81
5.7.1. Оценка содержания TGF- в сыворотке крови крыс 82
5. 7.2. Оценка содержания IL-1 в сыворотке крови крыс 86
5.7.3. Оценка содержания TNF- в сыворотке крови крыс 89
Заключение 91
Выводы 96
Список использованных сокращений 97
Список использованной литературы
