Введение
1 Литературный обзор.., .8
1.1 Препараты протеаз из поджелудочной железы 8
1.2 Характеристика панкреатических протеолитических ферментов 11
1.2.1 Трипсин 12
1.2.2 Химотрипсин 16
1.2.3 Эластаза 19
1.2.4 Коллагеназа 22
1.3 Протеазы поджелудочной железы человека 24
1.4 Протеолитические ферменты кур 27
1.5 Использование протеолитических ферментов в народном хозяйстве 31
2 Материал и методы исследования 37
2.1 Определение концентрации белка 37
2.2 Высаливание, обессоливание, концентрирование 38
2.3 Определение активности ферментов 39
2.3.1 Определение активности ферментов по природным і субстратам 39
2.3.2 Определение активности ферментов по синтетическим субстратам - 41
2.4 Разделение и очистка ферментов 43
2.4.1 Гель-хроматография 40
2.4.2 Ионообменная хроматография * 44
2.4.3 Изоэлектрическое фокусирование 45
3 Результаты исследования и их обсуждение 44
3.1 Разработка способа определения активности эластазы по N-трет-бутилоксикарбонил-аланин-р-нитрофениловому эфиру 47
3.2 Получение ферментных препаратов из поджелудочной железы кур, свиней и крупного рогатого скота 48
3.2.1 Содержания ферментов в поджелудочной железе 49
3.2.2 Изучение условий экстракции 52
3.2.3 Активация проферментов поджелудочной железы кур 61
3.2.4 Высаливание протеолитических ферментов 67
3.2.3 Общая схема получения комплексного ферментного препарата 75
3.3 Сравнение препарата протеаз из поджелудочной железы кур с
аналогичными свиней и крупного рогатого скота 80
3.3.1 Активность ферментов в полученных препаратах 80
3.3.2 Хроматографический анализ препаратов на сефадексе G-75 82
3.3.3 Исследование ферментного состава препаратов методом изоэлектрофокусирования 87
3.3.4 Анализ препаратов ионообменной хроматографией 94
3.4 Сравнение лечебных свойств препарата из поджелудочной железы курс аналогичными крупного рогатого скота и свиней 109
3.4.1 Разработка условий применения препаратов при лечении ожогов 109
3.4.2 Клиническая апробация препаратов при лечении ожогов 112
Выводы 114
Список литературы 116
Приложения * 136
