Введение
Глава I. Гибриды соматических клеток как объект для исследования 9
1.1. Значение гибридизации клеток в изучении генетических проблем 9
1.2. Слияние и гибридизация клеток 12
1.3. Изоляция гибридных клонов (селективные системы) 18
1.4. Потери хромосом в гибридных клетках 25
Глава II. Гибридизация соматических клеток в изучении признаков дифференцировки 33
2.1. Проявление признаков дифференцировки в гибридных соматических клетках 33
2.2. Значение определения фермента щелочной фосфатазы в медицинской практике 37
2.3. Генетическая детерминация щелочной фосфатазы 39
Глава III. Цитологическое проявление функционирования рибосомных генов 44
3.1. Активность ядрышковых организаторов в нормальных клетках человека 44
3.2. Активность ядрышковых организаторов в опухолевых клетках и клетках с аномальным кариотипом 47
3.3. Ассоциации акроцентрических хромосом и цитологическое проявление в клетках человека 50
3.4. Активность ядрышковых организаторов в гибридных клетках 53
Глава ІV. Материалы и методы 61
4.1. Клеточные линии 61
4.2. Селективные и неселективные питательные среды 61
4.3. Метод пассирования 62
4.4. Глубокое замораживание штаммов, клеточных линий и клонов 63
4.5. Гибридизация клеток человека и китайского хомячка 64
4.6. Цитоморфологический анализ родительских и гибридных клеток 65
4.7. Определение времени удвоения популяции клеток 66
4.8. Выявление фермента щелочной фосфатазы 67
4.9. Приготовление хромосомных препаратов . 68
4.10. Окраска хромосомных препаратов 69
4.11. Критерии оценки активности ядрышковых организаторов и ассоциативной способности методом Ag-окраски 70
4.12. Микрофотографирование 71
Глава V. Получение гибридных соматических клеток человек-китайский хомячок 72
Характеристика родительских клеток . 72
5.1. Выживаемость клеток на среде ГАТТ 72
5.2. Влияние уабаина на жизнеспособность клеток 74
5.3. Влияние полиэтиленгликоля на клетки человека и китайского хомячка 76
5.4. Гибридизация клеток человека и хомячка . 79
Глава VІ. Доказательства гибридой природы полученных клонов 81
6.1. Морфология клеток 81
6.2. Культуральные свойства . 81!
6.3. Время удвоения популяции клеток 83
6.4. Хромосомный состав гибридных клонов 84
Глава VII. Сохранение родительских признаков в гибридных клетках . 100
7.1. Влияние компонентов селективной среды на выживаемость гибридных клеток 100
7.2. Активность щелочной фосфатазы в гибридных клетках 104
Глава VIII. Исследование состояния ядрышковых организаторов в гибридных соматических клетках человек-китайский хомячок 108
8.1. Активность ЯОР хромосом человека и китайского хомячка в родительских и гибридных клетках 108
8.2. Ассоциации ЯОР хромосом в гибридных клетках 115
8.3. Количество активных ЯОР хромосом в клонах различной плоидности 120
Обсуждение 128
Выводы... 145
Список сокращений 146
Список литературы . 147
