Введение
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 12
1.1. Классификация методов иммобилизации биологически активных веществ 12
1.2. Липосомы 14
1.3. Микрокапсулы 16
1.3.1. Основные преимущества и недостатки процесса микрокапсулирования 18
1.3.2. Полимерные материалы для микрокапсулирования биологически активных веществ 19
1.3.3. Методы микрокапсулирования биологически активных веществ 23
1.3.3.1. Физические методы микрокапсулирования 23
1.3.3.1.1. Напыление в псевдоожиженном слое 23
1.3.3.1.2. Микрокапсулирование экструзией 24
1.3.3.1.3. Микрокапсулирование путем конденсации паров 25
1.3.3.2. Химические методы микрокапсулирования 25
1.3.3.2.1. Микрокапсулирование поликонденсацией 26
1.3.3.2.2. Метод полимеризации 27
1.3.3.2.3. Дубление мембран микрокапсул 28
1.3.3.3. Аэрозольный метод микрокапсулирования 29
1.3.3.4. Физико-химические методы микрокапсулирования 30
1.3.3.4.1. Методы эмульгирования 30
1.3.3.4.2. Микрокапсулирование в расплавы 31
1.3.3.4.3. Высушивание распылением 31
1.3.3.4.4. Методы основанные на простой и сложной коацервации 32
1.4. Полиэлектролитные микрокапсулы, полученные методом послойной адсорбции 33
1.4.1. Интерполиэлектролитные комплексы 33
1.4.2. Интерполиэлектролитные комплексы для микрокапсулирования биологически активных веществ 35
1.4.3. Подбор полиэлектролитов для формирования микрокапсул 36
1.4.4. Технология послойной адсорбции полиэлектролитов 39
1.4.5. Формирование полых микрокапсул 41
1.4.6. Полиэлектролитные микрокапсулы как способы доставки биологически активных веществ 44
1.4.6.1. Инкапсулирование высомолекулярных биологически активных веществ 44
1.4.6.2. Некоторые подходы к регулированию выхода биологически активных веществ из микрокапсул 45
1.4.6.2.1. Ферментативная деструкция полиэлектролитных микрокапсул 47
1.5. Заключение 51
Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 52
2.1. Материалы и реагенты 52
2.2. Методы 53
2.2.1. Получение микрокапсул методом простой коацервации. 53
2.2.2. Получение СаСОз микрочастиц 53
2.2.3. Включение биологически активных веществ в СаСОз микрочастицы методом сорбции в порах 54
2.2.3.1. Включение химотрипсина 54
2.2.3.2. Включение экстрактов подорожника и календулы 54
2.2.4. Включение биологически активных веществ в СаСОз микрочастицы методом соосаждения 55
2.2.4.1. Включение проназы 55
2.2.4.2. Включение ДНК и проназы 55
2.2.4.3. Включение экстрактов подорожника и календулы 55
2.2.5. Получение микрокапсул методом послойной адсорбции 56
2.2.6. Определение содержания биологически активных веществ в микрокапсулах и в растворах 57
2.2.6.1. Определение проназы 57
2.2.6.2. Определение ДНК 57
2.2.6.3. Определение химотрипсина 57
2.2.6.4. Определение экстрактов подорожника и календулы 58
2.2.7. Измерение эстеразной активности химотрипсина 58
2.2.8. Получение полиэлектролитов и белков, меченных флуоресцентной меткой 58
2.2.9. Изучение кинетики выхода биологически активных веществ из микрокапсул 59
2.2.9.1. Выход ДНК 59
2.2.9.2. Выход химотрипсина 59
2.2.9.3. Выход экстрактов подорожника и календулы 60
2.2.10. Исследование времени деструкции (PAsp/PArg)3PAsp микрокапсул 60
2.2.11. Исследование морфологии (PAsp/PArg)3PAsp микрокапсул...61
2.2.12. Измерение Z-потенциала СаС03 микрочастиц 61
2.2.13. Исследование распределения микрочастиц по размерам 61
2.2.14. Исследование эффектов инкапсулированных экстрактов на процесс заживления язвы желудка у крыс 62
Глава 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ 63
3.1. Получение и исследование микрокапсул полученных методом простой коацервации 63
3.2. Получение и исследование микрокапсул полученных методом послойной адсорбции 69
3.2.1. Основные принципы конструирования биодеградируемых полиэлектролитных микрокапсул 69
3.2.2. Подходы к биодеструкции микрокапсул 73
3.2.2.1. Выбор полиэлектролитов 75
3.2.2.2. Выбор ферментов для разрушения мембраны микрокапсул 78
3.2.3. Получение и исследование микрокапсул на основе полипептидов с включенной в них ДНК 82.
3.2.3.1. Включение ДНК в PAsp/PArg микрокапсулы 82
3.2.3.2. Исследование деструкции полипептидных микрокапсул под действием инкапсулированной проназы 84
3.2.3.3. Исследование кинетики выхода ДНК из микрокапсул 89
3.2.4. Получение и исследование микрокапсул на основе полипептидов и полисахаридов с включенным в них белком 91
3.2.4.1. Включение химотрипсина в Alg/PLL микрокапсулы 91
3.2.4.2. Изучение активности инкапсулированного химотрипсина.93
3.2.4.3. Исследование кинетики выхода химотрипсина из микрокапсул 95
3.2.5. Получение и исследование микрокапсул на основе полисахаридов с включенным в них биологически активными веществами лекарственных растений 97
3.2.5.1. Включение экстрактов подорожника и календулы в Хит/Кар микрокапсулы 97
3.2.5.2. Исследование кинетики выхода экстрактов подорожника
и календулы 99
3.2.5.3. Исследование возможности использования Хит/Кар
микрокапсул для репарации тканей 100
ВЫВОДЫ 105
БЛАГОДАРНОСТИ 107
ЛИТЕРАТУРА 108
