Введение
1. Введение 6
2. Обзор литературы 11
2.1. Культуры клеток кожи млекопитающих и история их получения 11
2.2. Гистологическое строение и эмбриогенез кожи млекопитающих 13
2.3. Методы получения и культивирования кератиноцитов млекопитающих 23
3. Собственные исследования 28
3.1. Материалы исследований 28
3.1.1. Питательные среды и растворы 28
3.1.2. Постоянные линии и диплоидные штаммы клеток 29
3.1.3. Штаммы вирусов 29
3.2. Методы исследований 30
3.2.1. Получение первичной культуры клеток кожи 30
3.2.2. Подсчет концентрации клеток в суспензии 31
3.2.3. Определение доли жизнеспособных клеток и подсчет индекса пролиферации 32
3.2.4. Цитологические методы исследования 32
3.2.5. Кариологическое исследование 33
3.2.6. Электронно-микроскопическое исследование 34
3.2.7. Вирусологические исследования 34
3.2.8. Криоконсервирование и создание банка культур клеток 37
3.3. Результаты исследований 38
3.3.1. Разработка оптимальных условий ферментативного разделения эпидермального и дермального слоев кожи плодов кролика, кошки, собаки 38
3.3.2. Разработка оптимальных условий ферментативной дезагрегации ЭСКП кролика, кошки, собаки 39
3.3.3. Разработка оптимальных условий культивирования первичных культур ЭСКП кролика, кошки, собаки 48
3.3.4. Определение эффективности ростовых свойств питательных сред для культивирования первичных культур ЭСКП кролика, кошки, собаки 49
3.3.5. Субкультивирование клеток ЭСКП кролика, кошки, собаки 53
3.3.6. Сравнительное изучение культурально-морфологических свойств полученных культур с постоянной линией RSK и диплоидным штаммом КЭК 64
3.3.7. Изучение динамики митотической активности в процессе длительного культивирования клеток ЭСКП кролика 71
3.3.8. Сравнительный кариологический анализ культуры клеток ЭСКП кролика и постоянной линии RSK 73
3.3.9. Ультраструктурная характеристика состава клеточной культуры ЭСКП кролика 76
3.3.10. Изучение влияния глубокого замораживания на жизнеспособность клеток ЭСКП кролика, кошки, собаки 95
3.3.11. Изучение чувствительности культуры клеток ЭСКП кролика к вирусам 96
4. Обсуждение результатов исследований 109
5. Выводы 120
Практические предложения 122
Список литературы 123
Приложение 135
