Введение
Глава 1. Введение 6
1.1. Цель и задачи исследования 8
1.2. Научная новизна и практическая значимость 8
1.3. Положения, выносимые на защиту ю
1.4. Апробация работы 10
1.5. Публикации 11
1.6. Структура и объем диссертации 11
Глава 2. Современное состояние проблемы. Анализ литературных данных 12
2.1. Развитие поджелудочной железы 13
2.2. Генетические механизмы развития поджелудочной железы 16
2.3. Формирование энтодермы 20
2.4. Ключевые гены панкреатической детерминации и дифференцировки 25
2.4.2. Ген nkx2.2 27
2.4.3. Гены nkx6.1 иnkx6.2 28
2.4.4. Ptfla 29
2.5. Гены эндокринной дифференцировки 30
2.5.1. Neurod 30
2.5.2. Neurogenin 3 31
2.5.3. Notch сигнальный путь 32
2.5.4. Hesl 34
2.5.5. Isll 34
2.5.6.рах4ирах6 35
2.5.7. Mafa 36
2.6. Проблема лечения сахарного диабета 36
2.7. Сигнальный путь инсулина 38
2.8. Диабет зрелого типа у молодых (mody) 41
2.9. Современные подходы к лечению инсулпнзависпмого сахарного диабета 43
2.9.1. Терапия, основанная на восстановлении регенерации в- клшок островков лангерганса 43
2.9.2. Терапия, основанная на трансплантации островков лангерганса 45
2.9.3. Терапия с-шрного диабета с помощью стволовых клеток 46
Глава 3. Материалы и методы 50
3.1. Получение культуры клеток 50
3.2. Выделение cd146+популяции клеток 51
3.4. Дифференцирование выделенных mck 53
3.5. Получение аденовирусной конструкции 54
3.6. Трансфекцпя клеток и индукция панкреатической дифференцировки 59
3.7. Анализ экспрессии панкреатических маркерных генов 60
3.7.1. Анализ изменения транскрипции генов 60
3.7.2. Иммуноцитохимическое окрашивание клеток 63
3.7.3. Анализ транскрипции инсулина во времени 63
3.7.4. Elisa (тест на толерантность к глюкозе) 64
3.8. Статистическая обработка данных 64
Глава 4. Результаты и обсуждение 65
4.1. Трансфекция pad5-pdx1 стандартных мск из жировой ткани и пупочного канатика человека 67
4.2. Трансфекция pad5-pdx1 мск периваскулярного фенотипа из жировой ткани и пупочного канатика человека 74
4.3. Выбор условий дифференцировки трансфицированных популяций мск cd146+cd31-человека pad5-pdx1 80
4.4. Анализ экспрессии нестина в исследованных популяциях МСК 86
Глава 5. Заключение 89
Глава 6. Выводы 90
Список литературы
