Введение
Глава 1. Холерный вибрион серогруппы: характеристика свойств и лабораторная диагностика 14
Глава 2. Принципы конструирования иммуноглобулиновых флуоресцирующих диагностических препаратов 31
Глава 3. Материалы и методы 39
3.1. Бактериальные штаммы 39
3.2. Питательные среды и условия культивирования 40
3.3. Антигены 41
3.4. Экспериментальные животные 42
3.5. Реактивы и растворы 42
3.6. Оборудование и приборы 43
3.7. Методы выделения и очистки иммуноглобулинов 45
3.8. Получение флуорохромных конъюгатов 46
3.9. Изготовление пероксидазных конъюгатов 46
3.10. Серологические и иммунохимические методы исследования 46
3.11. Статистическая обработка 48
Глава 4. Получение гипериммунных холерных агглютинирующих сывороток к vibrio cholerae 0139 49
4.1. Подбор животных-продуцентов 50
4.2. Получение и физико-химическая характеристика антигенов для иммунизации животных-продуцентов 51
4.3. Схемы иммунизации продуцентов 54
4.4. Иммуногенные свойства антигенов и эффективность различных схем иммунизации 60
4.5. Изучение стабильности нативных иммунных кроличьих сывороток в процессе хранения 67
Глава 5. Изготовление и характеристика флуоресцирующих иммуноглобулинов к vibrio cholerae 0139 70
5.1. Сравнительная характеристика эффективности методов фракционирования холерных 0139 кроличьих иммуноглобулинов ... 70
5.2. Флуоресцентная метка иммуноглобулинов 75
5.3. Изучение активности и специфичности флуорохромных конъюгатов 77
5.4. Повышение специфичности холерных 0139 флуоресцирующих иммуноглобулинов 78
5.5. Стерилизующая фильтрация иммуноглобулинов 82
Глава 6. Стабилизация свойств флуоресцирующих иммуноглобулинов к vibrio cholerae 84
6.1. Лиофилизация препарата 84
6.2. Использование протекторов для стабилизации иммуноглобулинов 85
6.3. Изучение влияния температурного режима и сроков хранения на основные свойства холерных флуоресцирующих имму ноглобулинов 86
Глава 7. Применение флуоресцирующих иммуноглобулинов для детекции vibrio cholerae 91
7.1. Эффективность скрининга чистых культур V. cholerae 0139 прямым методом флуоресцирующих антител 91
7.2. Обнаружение V. cholerae 0139 в искусственно инфицированных образцах биологического материала и объектов внешней среды 102
7.3. Идентификация V. cholerae Ol39 различными методами экспресс-анализа с применением флуоресцирующих иммуноглобулинов 104
Заключение 113
Выводы 122
Список использованных источников 124
