Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор
1.1. Строение и химические свойства фукозы і Q
1.2 Фукоза в живых организмах 12
1.2.1 Метаболизм фукозы 15
1.2.1.1 Путь de novo 15
1.2.1.2 Путь непосредственного фосфорилирования фукозы 18
1.2.1.3 Другие пути метаболизма фукозы 21
1.3 Строение и свойства фукоиданов 23
1.4.1 Химические способы получения фукозы 28
1.4.2 Способы получения фукозосодержащих олигосахаридов з 2
1.4.3 Биохимические способы получения фукозы.
Микроорганизмы - продуценты фукозидаз 35
ГЛАВА 2. Объекты и методы иследовании 43
2.1. Объекты исследований 43
2.1.1. Культивирование микроскопического гриба Aspergillus awamori ВКМF-808 43
2.2. Методы исследования 44
2.2.1 Определение активности a-L-фукозидазы 44
2.2.2 Определение степени гидролиза фукоидана 46
2.2.3 Биохимические и микробиологические методы исследования 47
2.2.4 Получение спиртоосажденного фермента 48
2.2.5 Определение уровня антителообразования 49
2.2.6 Определение степени фукозилирования ооцита 50
2.2.7 Статистическая обработка данных 51
2.3 Схема экспериментальных исследований 51
ГЛАВА 3. Разработка биокаталитической технологии фукозы из растительного сырья 53
3.1 Подбор источников фукоиданов из растительного сырья 53
3.2 Выделение фукоидана из биомассы бурых водорослей 55
3.2.1 Моделирование и оптимизация процесса экстракции фукоидана с использованием экспериментально статистического подхода 57
3.3 Поиск активного продуцента a-L-фукозидазы 73
3.4 Выбор оптимальных условий культивирования продуцента
фукозидазы 78
3.4.1 Изучение влияния источников углерода на биосинтез фукозидазы 78
3.4.2 Исследование влияния различных факторов на синтез фукозидазы g0
3.4.3. Разработка условий осаждения ферментного препарата g4
3.5 Ферментативная деструкция фукоиданов g8
3.5.1 Выбор оптимальных условий гидролиза фукоидана g9
3.6 Разработка лабораторного регламента получения фукозы 94
3.6.1 Получение фукозы из растительного сырья 94
ГЛАВА 4. Исследование биологической активности фукозы 99
4.1 Изучение пребиотических свойств фукозы 99
4.2 Исследование влияния фукозы на иммунный статус млекопитающих 104
4.3 Изучение влияния фукозы на репродуктивную функцию млекопитающих 109
Расчет себестоимости фукозы по предлагаемой технологии заключение 115
Выводы п6
Список использованных источников 117
Приложения
