Введение
1. Обзор литературы 9
1.1. Значение клевера как кормовой культуры; проблемы селекции клевера 9
1.2. Системы молекулярного маркирования генома 13
1.3. Использование молекулярных маркеров в современной селекции 26
1.4. Генетические карты и их использование в селекции растений 32
2. Материалы и методы исследований 38
3. Результаты исследований 53
Глава 3.1. Описание и поддержание экспериментальной популяции клевера лугового ГП-27 53
3.1.1. Оценка фенотипического варьирования признаков 53
3.1.2. Введение генотипов изучаемой популяции в культуру in vitro 55
Глава 3.2. Молекулярный анализ и создание генетической карты сцепления клевера лугового 61
3.2.1. Оптимизация условий выделения ДНК из растительной ткани клевера 61
3.2.2. Сравнительный анализ различных систем молекулярного маркирования 67
3.2.3. Оптимизация условий и параметров PCR с использованием рандомных праймеров (RAPD-PCR) 68
3.2.4. Использование праймеров с дополнительным селективным нуклеотидом для повышения надёжности RAPD-маркеров 74
3.2.5. Исследование ДНК-полиморфизма с использованием сиквенс-специфических праймеров (STS-технология) 79
3.2.6. Детекция ДНК-полиморфизма с помощью CAPS-маркеров 87
3.2.7. Использование ДНК-маркеров в создании генетической карты клевера лугового (Trifolium pratense L.) 91
Глава 3.3. Анализ косегрегации полученных ДНК-маркеров с фенотипическими проявлениями устойчивости растений 93
3.3.1. Оценка зимостойкости гибридной популяции ГП-27 в различных условиях 93
3.3.2. Оценка устойчивости к склеротиниозу (Sclerotinia trifoliorum Erikss.) 96
3.3.3. Детекция локусов генов, связанных с признаками устойчивости и локализация их на интегрированной генетической карте 99
3.3.4. Выделение новых источников хозяйственно ценных признаков для селекции клевера лугового 100
Выводы 105
Предложения для селекционной практики 108
Список используемой литературы 109
Приложения 129
