Введение
ГЛАВА 1. Литературный обзор 15
1. Бактериальные патогены и их определение 15
1.1 Обзор стандартных методов идентификации бактерий 17
1.2 Новые методы и подходы в детекции бактерий 19
1.3 Биосенсоры: классификация и применение для идентификации бактерий 22
1.4 Иммуносенсоры в детектировании бактерий 25
1.4.1 Оптическая иммунодетекция бактерий 27
1.4.2 Электрохимическая иммунодетекция бактерий 28
1.5 Наночастицы в детекции бактерий 33
1.6. Нанокомпозиты в детекции бактерий 38
1.6.1 Получение полимерных нанокомпозитов 40
1.6.2 Применение нанокомпозитов 45
2. Вирусные агенты и их определение 47
3. Постановка задачи 54
ГЛАВА 2. Аппаратура и техника эксперимента 57
2.1 Оборудование и средства измерений 57
2.2 Реактивы, рабочие растворы 59
2.3 Методики эксперимента 61
2.3.1 Методики получения наночастиц Без04 61
2.3.2 Методика получения нанокомпозитных частиц на основе Тез04. с поливинилбензилхлоридным покрытием, модифицированным гетероциклическими соединениями 61
2.3.3 Методика получения нанокомпозитных частиц на основе Fe304. с полипиррольным покрытием (Fe304-nn) з
2.3.4 Методика получения нанокомпозитных частиц на основе Fe304. с ферроценмодифицированной оксидкремниевой оболочкой (Fe304 ФЦБЮг) 66
2.3.6 Методики микроскопических исследований 68
2.3.7 Условия культивирования бактериальных штаммов 69
2.3.8 Методика постановки ИФА 69
ГЛАВА 3. Синтез и исследование электроактивных нанокомпозитных частиц на основе Fe304 72
3.1 Нанокомпозиты с полимерным поливинилбензилхлоридным покрытием, модифицированным азотсодержащими гетероциклическими соединениями 73
3.2 Нанокомпозиты с электроактивным полимерным покрытием на основе полипиррола (Fe304-nn) 77
3.3 Нанокомпозиты с ферроценмодифицированным оксидкремниевым покрытием (Fe304 HSi02) 82
3.4 Определение динамики изменения размеров агломератов нанокомпозитных частиц в водных суспензиях 84
3.5 Электрохимические исследования синтезированных нанокомпозитных частиц 87
3.5.1 Нанокомпозитные частицы с полимерным поливинилбензилхлоридным покрытием, модифицированным хинолином 87
3.5.2 Нанокомпозитные частицы с электроактивным полимерным покрытием на основе полипиррола 89
3.5.3 Нанокомпозитные частицы с оксидкремниевым покрытием, модифицированным ферроценом 91
3.6 Выбор нанокомпозитных частиц для использования в иммуноанализе94
ГЛАВА 4. Разработка бесферментного электрохимического метода определения патогенных микроорганизмов с использованием синтезированных нанокомпозитов на основе Fe304 95
4.1 Микроскопические исследования взаимодействия нанокомпозитных частиц с бактериальными клетками 95
4.2 Процедура иммуноанализа 99
4.3 Применение в иммуноанализе нанокомпозитов с полимерным покрытием на основе поливинилбензилхлорида, модифицированного хинолином 101
4.4 Применение в иммуноанализе нанокомпозитов с электроактивным полипиррольным покрытием 102
4.5 Применение в иммуноанализе нанокомпозитов с электроактивным ферроценмодифицированным оксидкремниевым покрытием 103
4.6. Определение правильности, специфичности и селективности метода электрохимического иммуноанализа 107
4.7 Анализ реальных объектов 109
ГЛАВА 5. Применение конъюгатов антител с нанокомпозитными частицами с оксидкремниевым покрытием для определения антигенов вирусов 112
5.1 Получение конъюгатов антител с НК на основе Гез04 с оксидкремниевым покрытием (Fe304 - ATSi02) 112
5.2 Процедура иммуноанализа 114
Заключение 120
Список условных обозначений и сокращений 122
Список литературы
