Введение
1. Введение 6
2. Обзор литературы 11
2.1. Характеристика возбудителя вирусной лейкемии кошек 11
2.1.1 История 11
2.1.2 Таксономия и классификация возбудителя 11
2.1.3 Вирион и структура генома
2.2. Эпизоотология заболевания 14
2.3. Особенности патогенеза 18
2.4. Клинические симптомы 24
2.5. Методы диагностики вирусной лейкемии кошек 27
2.6. Лечение 33
2.7. Средства специфической профилактики 36
3. Собственные исследования 44
3.1 Материалы и методы 44
3.1.1 Вирусы, культуры клеток и питательные среды 44
3.1.2 Определение количества и жизнеспособности клеток 44
3.1.3 Криоконсервация культуры клеток 45
3.1.4 Инактивация вируса 45
3.1.5 Адъюванты 45
3.1.6 Определение стерильности 46
3.1.7 Экспериментальные животные 46
3.1.8 Выделение РНК as
3.1.9 Амплификация и клонирование reHagp70 вЕ.соІі 47
3.1.10 Приготовление питательной среды LB и L-arapa 48
3.1.11 Получение компетентных клеток 48
3.1.12 Трансформация компетентных клеток E.coli 49
3.1.13 Наращивание
3.1.14 Индукция 50
3.1.15 Сыворотки 50
3.1.16 Очистка рекомбинантного белка rgp70 методом металло-хелатной аффинной хроматографии (МХАХ) 50
3.1.17 Определение концентрации белка 51
3.1.18 Оценка иммунологической активности белка rgp70 52
3.1.19 Учет и интерпретация результатов ИФА 52
3.1.20 Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия
(ПААГ-ДСН) .53
3.1.21 Статистическая обработка результатов 54
3.2 Результаты собственных исследований 55
3.2.1 Изучение условий культивирования культуры клеток F422 55
3.2.2 Инактивация вируса 58
3.2.3 Определение антигенной активности культуральной инактивированной вакцины против В ЛК на лабораторных животных 59
3.2.4 Определение антигенной активности культуральной инактивированной вакцины против ВЛК на кошках 62
3.2.5 Изготовление и контроль опытных серий вакцины против вирусной лейкемии кошек 67
3.2.6 Получение и характеристика рекомбинантного оболочечного гликопротеина ВЛК gp70 (rgp70) 69
3.2.7 Разработка тест-системы по определению антител к оболочечному гликопротеину вируса лейкемии кошек gp70 з
4. Обсуждение 78
5. Выводы 88
6. Практические предложения 89
7. Список литературы 89
8 Приложение
