Введение
Благодарности 13
1. Литературный обзор 14
1.1. Общие сведения о сорбции 14
1.2. Металл-аффинная адсорбция 17
1.3. Фосфорорганические отравляющие вещества
1.3.1. Физические свойства и история разработки боевых ФОВ 19
1.3.2. Механизм действия 20
1.3.3. Реакция зарина с АХЭ 21
1.3.4. Взаимодействие с эстеразами 25
1.4. Аналитические методы определения ФОВ и продуктов воздействия ФОВ на организм 26
1.4.1. Масс-спектрометрия в фосфопротеомике 28
1.4.2. Электроспрей 28
1.4.3. Матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация 29
1.5. Сорбционная очистка и концентрирование 33
1.5.1. Металл-аффинные сорбенты 33
1.5.2. Металл-оксидные сорбенты 35
1.5.3. Металл-хелатные сорбенты 38
1.6. Тонкие пленки 40
1.6.1. Получение тонких пленок 40
1.6.2. История метода Ленгмюра-Блоджетт 40
1.6.3. Свойства пленок Ленгмюра-Блоджетт 41
2. Экспериментальная часть 47
2.1. Материалы и методы исследований 47
2.2. Методы исследования физико-химических свойств
2.2.1. Получение монослоев стеарата лантана 49
2.2.2. Исследование структурного звена монослоя стеарата лантана 49
2.2.3. Стандартизация монослоёв стеарата лантана 50
2.2.4. Измерение удельной поверхности стеарата лантана методом низкотемпературной адсорбции азота 50
2.2.5. Изотермы сжатия монослоев стеарата лантана 50
2.2.6. Определение изоэлектрической точки для стеарата лантана 51
2.2.7. Исследование устойчивости пленок стеарата лантана в различных растворителях 51
2.2.8. Сканирующая электронная микроскопия коллапсированных пленок стеарата лантана 52
2.2.9. Микроволновый синтез дисперсного хромита лантана 53
2.2.10. Рентген-дифракционное определение хромита лантана 54
2.2.11. Исследование хромита лантана методом лазерной дифракции 54
2.2.12. Определение площади поверхности хромита лантана методом низкотемпературной адсорбции криптона 54
2.2.13. Сканирующая электронная микроскопия хромита лантана 55
2.3. Методы исследования сорбционной способности 56
2.3.1. Количественное определение сорбционной емкости пленочного стеарата лантана по фосфорилированному пептиду методом ВЭЖХ УФ 56
2.3.2. Десорбция с перерастворением сорбента 57
2.3.3. Определение сорбционной способности стеарата лантана по бычьему казеину методом АСМ 57
2.3.4. Качественный масс-спектрометрический анализ сорбционной способности стеарата лантана методом МАЛДИ МС 58
2.3.5. Качественное определение сорбционной способности хромита лантана по фосфорилированному пептиду методом МАЛДИ МС 58
3. Обсуждение результатов 60
3.1. Получение монослоев стеарата лантана 60
3.2. Определение условий получения сорбента 65
3.3. Определение электрокинетического потенциала 66
3.4. Определение устойчивости сорбента в растворителях 69
3.5. Сканирующая электронная микроскопия пленок стеарата лантана 71
3.6. Микроволновый синтез хромита лантана 74
3.7. Определение фазового состава хромита лантана 75
3.8. Определение размера частиц хромита лантана методом лазерной дифракции 76
3.9. Сканирующая электронная микроскопия хромита лантана 3.10. Исследование сорбции и десорбции казеина с поверхности пленок стеарата лантана методом атомно-силовой микроскопии 80
3.11. Количественное определение сорбции и десорбции фосфорилированных пептидов пленками стеарата лантана методом ВЭЖХ УФ 82
3.12. Исследование сорбции аддуктов ФОВ с сывороточным альбумином человека на монослоях стеарата лантана 83
3.13. Исследование сорбции аддуктов ФОВ с сывороточным альбумином человека на хромите лантана 84
3.14. Обоснование выбора сорбента для дальнейших исследований 86
3.15 Выделение аддуктов сывороточного альбумина человека с ФОВ методом металл-аффинной хроматографии на монослоях стеарата лантана (определение условий сорбции-десорбции) 87
3.15.1 Определение условий сорбции фосфонилированных пептидов из пептического гидролизата сыворочного альбумина человека, модифицированного зоманом, на монослоях стеарата лантана 87
3.15.2 Определение условий десорбции фосфонилированных пептидов сыворочного альбумина человека, модифицированного зоманом, с монослоев стеарата лантана 90
3.15.3 Исследование возможности десорбции аддуктов ФОС с сывороточным альбумином человека с сорбента путем разрушения структуры монослоев 92
3.15.4 Оптимизация методики металл-аффинной хроматографии 94
3.15.5 Металл-аффинная хроматография на МАЛДИ мишени 99
3.16 Исследование возможности выделения методом металл-аффинной хроматографии аддуктов холинэстеразы с ФОВ 102
3.16.1 Исследование сорбции и десорбции бутирилхолинэстеразы лошади, модифицированной RVx, методом атомно-силовой микроскопии 102
3.16.2 Исследование возможности выделения аддуктов холинэстеразы с зоманом методом металл-аффинной хроматографии на монослоях стеарата лантана 103
3.16.3 Сравнение специфичных свойств монослоев стеарата лантана с коммерчески доступными металл-аффинными сорбентами 107
Основные результаты 108
Список сокращений 109
Приложение 110
Список литературы 111
