Введение
1. Введение 6
2. Обзор литературы 12
2.1. Реовирусные заболевания кур 12
2.1.1. Распространенность реовирусных заболеваний среди коммерческой птицы 12
2.1.2. Вирусный теносиновит 12
2.1.3. Малабсорбционный синдром 16
2.1.4. Патотипы реовируса кур 18
2.1.5. Возрастная и породная резистентность 20
2.1.6. Иммунный ответ при теносиновите и малабсорбционном синдроме 20
2.2. Эффективность вакцинопрофилактики против реовирусных инфекций 22
2.3. Методы диагностики реовирусных заболеваний и характеристика выделенных изолятов
23
2.4. Молекулярно-биологическая характеристика реовирусов рода Orthoreovirus 25
2.4.1. Краткая характеристика семейства Reoviridae 25
2.4.2. Структура вириона представителей рода Orthoreovirus 26
2.4.3. Сруктура генома ортореовирусов 29
2.4.4. Белки ортореовируса 33
2.4.5. Репликация ортореовирусов 42
2.4.6. Генетическая изменчивость реовируса 44
2.5. Выявление генома и дифференциация штаммов реовирусакур молекулярно-биологическими методами 49
2.6. Заключение по обзору литературы 52
3. Материалы и методы 56
3.1. Материалы 56
3.2. Методы 63
4. Результаты собственных исследований и их обсуждение 72
4.1. Выбор праймеров 72
4.2. Оптимизация условий проведения ОТ-ПЦР-анализа 79
4.3. Исследование патологического материала 82
4.3.1 Сравнительная диагностическая чувствительность и специфичность при исследовании патологического материала предложенными системами ОТ-ПЦР 82
4.3.2. Выявление геномов реовируса кур и М. synoviae в пробахпатологического материала 84
4.3.3. Патолого-анатомические изменения при реовирусной инфекции 87
4.3.4. Патологические агенты, ассоциированные с реовирусной инфекцией 88
4.3.5. Случаи теносиновита при отсутствии реовирусной инфекции 90
4.4. Исследование биологических свойств некоторых выявленных изолятов 90
4.5. Анализ амплифицированных последовательностей генома выявленных изолятов 97
4.5.1. Вариабельность последовательностей участков генов S3 и S1 97
4.5.2. Сравнительный анализ полных последовательностей гена S1 трех выявленных изолятов реовируса кур 101
4.5.3. Дифференциация выявленных изолятов и вакцинного штамма S1133 с помощью секвенирования последовательностей фрагментов S3A и S35 гена S3 103
4.5.4. Анализ генетических групп известных штаммов реовируса кур 105
4.5.5. Анализ генетических групп, установленных по последовательностям участков S3A и S3B гена S3 выявленных изолятов 107
4.5.6. Анализ генетических групп, установленных по последовательностям 5-концевого фрагмента гена S1 выявленных изолятов 110
4.5.7. Сравнительный генетический анализ выявленных изолятов по последовательностям участков генов S1 и S3 112
4.5.8. Генетический анализ изолятов, выявленных на одном птицеводческом хозяйстве 115
4.5.9. Генетический анализ изолятов с определенными биологическими свойствами 116
4.6. Дифференциация изолятов реовируса кур с помощью анализа подвижности гетеродуплексов кДНК 120
5. Заключение 126
Выводы 133
