Введение
1 Обзор литературы 16
1.Ломефлоксацин, как действующее вещество новой наносомальной ЛФ. Его физико-химические и терапевтические свойства. Методы получения и применения 16
1.1 Ломефлоксацин в клинической практике 16
1.2 Ломефлоксацин. Химическая структура.
Методы получения и физико-химические свойства 22
2 Наносомальная лекарственная форма.
Преимущества и недостатки. 28
2.2. Общие сведения о наночастицах 28
2.2.1. История открытия и изучения наночастиц 28
2.2.2. Механизм действия наносомальных препаратов 30
2.2.3. Требования, предъявляемые к наночастицам и их классификация 34
3. Полимеры, используемые для получения наночастиц. Классификация полимеров 35
3.1. Наночастицы, получаемые на основе полиалкилцианоакрилатов (ПАПА) 38
3.2 Наночастицы, получаемые на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот 42
4. Наносомальные лекарственные формы фторхинолонов на основе сополимеров молочной и гликолевой кислот. 49
5. Методы получения наночастиц на основе полимеров различных типов 54
5.1 Получение наночастиц путем эмульгирования 55
5.2. Получение наночастиц путем нанопреципитации 57
6. Методы изучения и контроля параметров полученных наночастиц 58
II Материал и методы 59
1.Получение наносомальных форм ЛВ. 60
1.1 Метод преципитации 60
1.2 Метод одинарных эмульсий 61
1.3 Метод двойных эмульсий 61
1.3.1 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием PLGA 50:50, PLGA 75:25 и PLA 63
1.3.2 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с изменением соотношения ЛВ:полимер 63
1.3.3 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием различных первичных растворителей для полимера и ЛВ , 64
1.3.4 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием различных режимов гомогенизации 65
1.4 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с применением противоиона 65
1.4.1 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с применением противоиона, вводимого совместно с ломефлоксацином 66
1.4.2 Метод двойных эмульсий, осуществляемый 67
с применением противоиона, вводимого совместно с полимером
1.5 Метод двойных эмульсий, осуществляемый с использованием в качестве ПАВ TWEEN-80, декстрана, альбумина и ПВС 68
1.6 Гельфильтрация наносомального препарата 69
2. Анализ полученных наночастиц 70
2.1 Тест на ресуспендируемость 70
2.2 Определение размера наночастиц 70
3.1 Качественное и количественное определение ломефлоксацина в наночастицах и в супернатанте 71
3.3.1 Спектрофотометрический способ определения ломефлоксацина. 71
3.3.1.1 Определение общего содержания ломефлоксацина в наносомальной ЛФ 71
3.3.1.2 Определение содержания свободного и связанного ломефлоксацина в наносомальной ЛФ 71
3.3.2 Определение ломефлоксацина методом ВЭЖХ 73
4. Исследование параметров высвобождения ломефлоксацина из лекарственной формы in vitro. Релиз. Проведение диализа наносомального препарата и чистого вещества 74
5. Изучение полученных наносомальных композиций in vitro и in vivo 75
5.1 Определение специфической активности 75
5.2 Определение острой токсичности 76
5.3 Релиз in vivo 77 5.4. Изучение распределения чистого и наносомального ломефлоксацина по органам и тканям in vivo 78
III Результаты и их обсуждение 79
1.1 .Влияние технологических параметров синтеза на свойства получаемых наночастиц 80
1.1.1 .Метод получения НЧ и его
влияние на свойства получаемой наносомальной ЛФ 81
1.1.2 Зависимость свойств получаемых НЧ от типа используемого полимера (бутилцианоакрилат, PLA, PLGA 50:50) 84
1.1.3 Зависимость свойств получаемых НЧ от природы полилактида
1.1.4 Зависимость свойств получаемых НЧ от соотношения ЛВ:полимер 88
1.1.5 Зависимость свойств получаемых НЧ от типа используемого стабилизатора эмульсии 94
1.1.6 Изучение зависимости степени сорбции ЛВ в НЧ от способа предварительного растворения ломефлоксацина 96
1.1.7 Изучение зависимости степени сорбции ЛВ в НЧ от способа предварительного растворения полимера 98
1.1.8 Зависимость свойств НЧ от введения в синтез в качестве противоиона гликохолата калия гидрохлорида 100
1.1.9. Изучение зависимости степени сорбции ЛВ в НЧ от режима первичной и вторичной гомогенизации 102
1.1.10 Изучение зависимости свойств получаемых НЧ от времени первичной гомогенизации ^
1.1.11. Изучение зависимости свойств получаемых НЧ от времени вторичной гомогенизации 108
1.1.12 Изучение зависимости свойств получаемых НЧ
от времени совместного перемешивания перед первичным гомогенизированием 111
1.1.13 Изучение зависимости свойств получаемых НЧ
от времени перемешивания перед вторичным гомогенизированием 114
1.2Изучение стабильности экспериментальной лекарственной формы, разработка методов анализа 116
1.2.1 Изучение стабильности ломефлоксацина 116
1.2.2 Изучение стабильности суспензии наночастиц 118
2.1. Результаты исследования параметров высвобождения ЛВ
из полимерной матрицы in vivo и in vitro; изучение специфической активности наносомального препарата 118
2.2. Определение специфической активности 118
2.3. Определение острой токсичности 120
2.4. Высвобождение ЛВ из полимерной матрицы in vitro в условиях равновесного диализа 121
2.5. Высвобождение ЛВ из полимерной матрицы in vivo 123
2.6 Изучение фармакокинетики наносомального ломефлоксацина в сравнении с чистой субстанцией ЛВ 126
Заключение 139
Выводы 142
Список литературы 143
