Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 15
1.1 Перспективы генной терапии и доставка генного материала при патологии органа зрения 16
1.2 Применение постоянного магнитного поля в офтальмологии ... 27
1.3 Перспективы применения магнитных технологий с целью фиксации клеточного материала 31
ГЛАВА 2. Материалы и методы 36
2.1. Исследование безопасности и эффективности технологии насыщения эмбриональных стволовых клеток линии НЕК-293
магнитными частицами, и оценка их взаимодействия с магнитным имплантатом в эксперименте in vitro 36
2.1.1. Оценка пролиферативной активности и жизнеспособности стволовых клеток, меченных магнитными частицами 37
2.1.2. Оценка прочностных, токсикологических, цитотоксических и ростстимулирующих свойств магнитного имплантата 38
2.1.3. Исследование локального инвазивного воздействия полимерного эластичного магнитного имплантата на структуры глаза 44
2.1.4. Оценка эффективности взаимодействия внутриклеточных магнитных частиц и магнитного имплантата 46
2.2. Исследование эффективности метода субретинального введения эмбриональных стволовых клеток линии НЕК-293,
меченных магнитными частицами в эксперименте in vivo 47
2.2.1. Группы исследования и методы послеоперационного контроля 47
2.2.2. Методы морфологического исследования глазного яблока экспериментальных животных 49
ГЛАВА 3. Результаты экспериментальных исследований 52
3.1. Результаты разработки технологии введения магнитных частиц в эмбриональные стволовые клетки почки человека линии НЕК-293 53
3.1.1. Метод культивирования клеток и насыщения магнитными частицами 53
3.1.2. Результаты оценки пролиферативной активности и жизнеспособности стволовых клеток, меченных магнитными частицами 54
3.2. Результаты разработки оригинального магнитного имплантата для эписклеральной фиксации 56
3.2.1. Общая характеристика разработанного магнитного имплантата 57
3.2.2. Результаты оценки прочностных, токсикологических, цитотоксических, цитостатических и ростстимулирующих свойств магнитных имплантатов на культурах клеток 59
3.2.3. Результаты исследования локального инвазивного воздействия полимерного эластичного магнитного имплантата на структуры глаза 66
3.2.4. Результаты оценки эффективности взаимодействия внутриклеточных магнитных частиц и магнитного имплантата 72
3.3. Результаты разработки хирургического способа и устройства для локального субретинального введения клеток линии НЕК-293, содержащих магнитные частицы 74
3.3.1. Разработанное устройство для субреинального введения эмбриональных стволовых клеток линии НЕК-293, меченных магнитными частицами 75
3.3.2. Техника операции на глазах животных 78
3.4. Результаты экспериментального исследования in vivo эффективности способа субретинального введения эмбриональных стволовых клеток линии НЕК-293, меченных магнитными частицами 81
3.4.1. Результаты клинических наблюдений за экспериментальными животными 82
3.4.2. Результаты морфологического исследования 91
Заключение 97
Выводы 107
Практические рекомендации 108
Список литературы
