Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Носители для построения биосенсорных тест-систем 13
1.2. Биосенсорные тест-системы на основе иммобилизованных биологически активных веществ 32
Глава 2. Материалы, оборудование и методы исследования 43
2.1. Материалы и реактивы 43
2.2. Оборудование 44
2.3. Методы исследования
2.3.1. Определение удельной активности растворимого фермента ацетилхолинэстеразы 44
2.3.2. Приготовление фосфатного буферного раствора 46
2.3.3. Метод определения прочности полимерных материалов при деформации растяжения (ГОСТ 17035-86) 46
2.3.4. Определение относительного удлинения при разрыве 46
2.3.5. Определение статического коэффициента трения 47
2.3.6. Определение номинальной толщины пленки (ГОСТ 17035-86). 47
2.3.7. Определение массовой концентрации меди (ГОСТ 7388-72) 47
2.3.8. Приготовление буферного раствора (рН = 8,4) 49
2.3.9. Методы математической и статистической обработки данных 49
Глава 3. Конструирование композиционных материалов с иммобилизованными ферментами 52
3.1 Формирование структуры основы высокомолекулярных композиций для иммобилизации ферментов 52
3.2. Иммобилизация фермента ацетилхолинэстеразы 56
3.2.1 Оптимизация количества фермента ацетилхолинэстеразы в со ставе биосенсорной тест-системы 60
3.2.2. Влияние количества субстрата на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы 67
3.2.3. Изучение влияния рН среды на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы 68
3.2.4. Влияние температуры на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы 70
3.2.5. Влияние времени ингибирования и времени постановки ферментативной реакции на изменение удельной активности растворимого и иммобилизованного ферментов ацетилхолинэстеразы 71
3.2.6. Конструирование тест-системы и разработка способа обнаружения инсектицида карбофоса в почве 78
3.3. Иммобилизация фермента панкреатина 86
3.3.1. Оптимизация количества фермента панкреатина в составе биосенсорной тест-системы 89
3.3.2. Изучение влияния рН среды и температуры на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов панкреатина 94
3.3.3. Влияние времени ингибирования на изменение удельной активности растворимого и иммобилизованного ферментов панкреатина 98
3.3.4. Влияние времени ферментативной реакции на удельную активность растворимого и иммобилизованного ферментов панкреатина 99
3.3.5. Конструирование биосенсорной тест-системы на основе фермента панкреатина и разработка методики обнаружения ионов меди в воде 103
3.3.6. Изучение влияния сопутствующих ионов тяжелых металлов на определение ионов меди с использованием биосенсорной тест-системы 108
Заключение 111
Выводы 117
Список литературы
