Введение
1.Обзор литературы 16
1.1 Воздействие реальной или моделируемой микрогравитации на скелетную мышцу 16
1.2 Экспериментальные модели, используемые для изучения эффектов микрогравитации и механотрансдукции на скелетную мышцу 17
1.3 Механосенсорные молекулы 21
1.3.1 Механизм работы стретч-чувствительных каналов 21
1.3.2 Механосенсорные молекулы и пути передачи механического сигнала в скелетной мышце 23 1.4 Ключевая роль mTORC1 в реализации механического сигнала 29
1.4.1 Предполагаемые активаторы mTORC1 сигналинга 30
1.5 Влияние механической разгрузки на анаболические сигнальные системы и синтез белка 34
1.6 Стимуляция опорных афферентов в условиях моделируемой микрогравитации 38
2. Организация и методы исследований 42
2.1 Экспериментальные методы и подходы 42
2.1.1. Объект исследований 42
2.1.2 Методы работы с изолированной мышцей 42
2.1.3 Антиортостатическое вывешивание 45
2.1.4 Динамическая опорная стимуляция стопы 46
2.1.5 Антиортостатическое вывешивание крыс в течение 1, 3, 7 дней 47
2.1.6 Антиортостатическое вывешивание крыс в течение 1, 3, 7 дней с последующей эксцентрической нагрузкой ex vivo 48
2.1.7 Антиортостатическое вывешивание крыс в течение 7 суток с последующей эксцентрической нагрузкой ex vivo и блокированием стретч-чувствительных каналов 48
2.1.8 Анализ воздействия динамической опорной стимуляции стопы на анаболические процессы в постуральной мышце крысы на фоне 1 и 3 суточного вывешивания 49
2.1.9 Воздействие опорного стимула на фоне 3 суточного вывешивания на реализацию механического сигнала в постуральной мышце крысы в ответ на эксцентрическую нагрузку ex vivo 49
2.2 Методики обработки биоматериала и анализ данных 49
2.2.1 Анализ биомеханических параметров изолированной мышцы 49
2.2.2. ДДС-электрофорез с последующим вестерн-блоттингом 50
2.2.3 Оценка синтеза белка методом SUnSET 51
2.2.4 Анализ вестерн-блота 52
2.2.5 Анализ содержания тотальной и рибосомальной РНК 52
2.3 Статистическая обработка данных 53
3. Результаты исследования 54
3.1 Исследование анаболических сигнальных путей в скелетной мышце крысы на фоне 1, 3, 7 суточного вывешивания 54
3.2 Исследование анаболических сигнальных путей в скелетной мышце крысы после стандартной нагрузки ex vivo на фоне 1, 3, 7 суточного вывешивания 60
3.3 Исследование влияния механочувствительных каналов на реализацию механического сигнала после стандартной нагрузки ex vivo на фоне 7 суточного вывешивания 67
3.4 Изучение роли опорной афферентации в поддержании стабильности анаболических процессов в постуральной мышце млекопитающих на фоне 1 и 3 суточного вывешивания 73
3.5 Исследование реализации механического сигнала при действии опорного стимула в постуральной мышце млекопитающих на фоне 3 суточного вывешивания 83
4. Обсуждение результатов 89
4.1 Исследование анаболических сигнальных путей в скелетной мышце крысы на фоне 1, 3, 7 суточного вывешивания 89
4.2 Исследование анаболических сигнальных путей в скелетной мышце крысы после стандартной нагрузки ex vivo на фоне 1, 3, 7 суточного вывешивания 91
4.3 Исследование влияния механочувствительных каналов на реализацию механического сигнала после стандартной нагрузки ex vivo на фоне 7 суточного вывешивания 94
4.4 Изучение роли опорной афферентации в поддержании стабильности анаболический процессов в постуральной мышце млекопитающих на фоне 1 и 3 суточного вывешивания 96
4.5 Исследование реализации механического сигнала при действии опорного стимула в постуральной мышце млекопитающих на фоне 3-суточного вывешивания 99
Выводы 101
Список использованной литературы 102
