Введение
Обзор литературы 9
Характеристика пептидного семейства меланокортинов 9
Локализация и синтез ме іанокорітшов в мозге м іекопитающих 12
Рег/епторы к мсланокортинам 14
Взаимодействие мечанокортинов с медиаторными системами 19
Поотропные эффекты мечанокортинов 22
Нейропротекторные и нейротрофическне эффекты мечанокортинов 24
Семакс - синтетический аналог АКТГ4 ,,, 27
Гипотеза о реализации ноотропного и нейропротекторного воздействия мечанокортинов через регучяцию
экспрессии белков семейства неиротрофшюв 29
Характеристика билковоі о семейства неиротрофинов 30
Рецепторы неиротрофинов 32
Иейротрофический фактор мозга (BDNF) 35
Функции BDNI в нервной системе 36
Структура и регучяция транскрипции гена bdnf 40
Характеристика транскрипционного фактора creb 43
CREB-зависимая активация транскрипции 45
Функции CREB в нервной системе 49
Характеристика фактора нейрогенеза VEGF 54
Экспрессия VLGF и рецепторов к VEGT в нервной системе 54
Структура и регуляция транскрипции гена \egf 55
Рецепторы VEGF 58
Функции VEGF в нервной систе ме 59
Материалы и методы исследования 64
Эксперименты на культурах астроцит ов и нейронов гиппокампа крысы 64
МТТ тест на количество живых клеток 66
Нммуноцитохимическое окрашивание первичных кучьтур нейронов на ЯШ-тубучин 67
Опредечение уровней мРНК иссчедуемых генов в культурах астроцитов и нейронов гиппокампа крысы
методом ПЦР 68
Определение уровней бечка BDNF в ку іьтурах нейронов гиппокампа крысы методом тшуноферментного
анализа 72
Эксперименты на живо гных in vivo 74
Определение уровней CREB и pCREB в гиппокампе методом иммунобпоттинга 74
Определение уровней бечков BDNF и NGF в гиппокампе крысы методом имиуноферментного анализа 77
Принудительное плавание 78
Почучение плазмы крови крысы 80
Определение уровней АКТГ и а-МСГв образцах плазмы крови с помощью иммуноферментного анализа 80
Статист истичьская оценка результа гов 81
Результаты и их обсуждение 83
1 Влияние острого стресса, вызванного принудительным плаванні м, на уровни а-мсг и актг в плазме крови крысы 84
2 Влияние а-мсг и семакса на уровьнь pcreb в гиппокампь крысы IN VIVO 93
3 Влияние А-МСГ, семакса и меланотана II на BDNF и NGF в гиппокампе крысы in vivo 98
4 Влияние а-мсг и семакса на уровень белка bdnr в первичной культуре нейронов гиппокампа крысы 104
5 Вовлеченность mc4r в осуществление эффектов а-мсг и семакса в культуре пгиронов гиппокампа крысы 109
6 Влияние mfjiahokopthhob на экспрессию мрнк bdnf в культуре астроцитов і иппокампа крысы , вовлеченность mc4r 114
7 Влияние а-мсг на экспрессию мрнк vegf в культуре астроцит ов гиппокампа крысы, роль mc4r 123
Заключение 128
Выводы 130
Список использованной литературы 131
Благодарности 145
