Введение
1. Обзор литературы 8
1.1. Типы Са2+-каналов и их классификация 8
1.2. Структура Са2+-каналов 10
1.3. Агматин: структура, распространение, метаболизм 15
1.4. Транспорт агматина 20
1.5. Мишени агматина: прямое действие 23
1.5.1. Рецепторы и каналы 23
1.5.2. Ферменты 25
1.6. Мишени агматина: непрямое действие 28
1.6.1. Ионные каналы 28
1.6.2. Митохондрии 29
1.6.3. Ферменты и метаболизм 31
1.7. Системные эффекты агматина 32
1.8. Имидазолиновые рецепторы: открытие, классификация, структура 34
1.9. Лиганды имидазолиновых рецепторов 37
1.10. Сигнальные пути имидазолиновых рецепторов 39
2. Материалы и методы исследования 43
2.1. Выделение клеток 43
2.2. Электрофизиологические эксперименты 44
2.3. Флуоресцентная и конфокальная микроскопия 47
2.4. Спектрофлуориметрические измерения 49
2.5. ПЦР анализ 49
2.6. Вестерн-блоттинг лизата кардиоцитов 51
2.7. Иммуноцитохимические аспекты 51
2.8. Статистический анализ 52
3. Результаты и обсуждения 53
3.1. Агматин и VGCC 53
3.2. Сигнальные пути, связанные с действием агматина на VGCC 55
3.3. Агматин, NO-синтаза и VGCC 57
3.4. Действие агониста I1Rs на VGCC 59
3.5. Агматин и внутриклеточный уровень Са2+ 62
3.5.1. Действие агматина на флуоресценцию зонда Fluo4 62
3.5.2. Спонтанные Са2+-волны как модель для оценки действия веществ 63
3.5.3. Источники кальция для генерации спонтанных Са2+-волн 66
3.5.4. Классификация спонтанных Са2+-волн 70
3.5.5. Действие агматина на [Са2+]in в изолированных кардиоцитах 74
3.6. Агматин, [Са2+]in, RyRs и SERCA 77
3.7. Механизмы, лежащие в основе действия малых доз агматина на [Са2+]in 79
3.8. Действие агониста I1Rs на [Са2+]in 81
3.9. Активация I1Rs и высокие концентрации агматина 83
3.10. Агматин и синтез NO 3.11. Низкие концентрации агматина, [Са2+]in и 2-ARs 86
3.12. Действие агониста 2-ARs на [Са2+]in 88
3.13. Противодействие I1Rs и 2-ARs на функциональность eNOS 90
3.14. Присутствие 2-ARs на сарколемме изолированных кардиоцитов 95
3.15. Демонстрация I1Rs в изолированных кардиомиоцитах 97
3.16. Взаимоотношения I1Rs и 2-ARs при действии на VGCC и [Са2+]in 99
3.17. Взаимодействие I1Rs и 2-ARs с -адренергической системой 103
3.18. Функциональность 2-ARs у спонтанно-гипертензивных крыс (SHR) 108
3.19. Изменения I1R-сигналинга в кардиомиоцитах SHR 114
Заключение 116
Выводы 118
Цитированная литература 119
