Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 13
1.1. Феномен иммунной памяти 13
1.2.Фенотипическая характеристика и функциональные особенности Т-клеток иммунной памяти
1.2.1 .Стволовые Т-клетки памяти (Т8см) 20
1.2.2.Ткане-резидентные Т-клетки памяти (TRM) 22
1.3. Фенотипическая характеристика и функциональные особенности В- клеток иммунной памяти
1.4. Краткая характеристика отдельных представителей семейства цитокинов I
типа, имеющих общую гамма цепь (ус) 27
1.5. Влияние цитокинов семейства I типа, имеющих общую гамма цепь рецепторов (ус) на гомеостаз Т-клеток 30
1.6. Основные поверхностные маркеры функциональной активности Т лимфопитов
1.6.1. Молекулы активации Т-клеток 35
1.6.2. Маркеры пролиферативной активности 3 9
1.6.3. Молекулы апоптоза 41
1.6.4. Молекулы межклеточной кооперации 42
1.6.5. Молекулы клеточной адгезии 45
ГЛАВА 2. Материал и методы исследований 47
2.1. Объект и материал исследования 47
2.2. Методы исследования 47
2.2.1. Выделение мононуклеарных лейкоцитов из периферической крови 49
2.2.2. Выделение CD45RA+ и CD45RO+ Т-лимфоцитов из фракции мононуклеарных лейкоцитов методом иммуномагнитной сепарации
2.2.3. Культивирование CD45RA и CD45RO Т-клеточных культур 52
2.2.4. Определение общего числа клеток (в мл) и количества жизнеспособных лимфоцитов в культурах CD45RA и CD45RO Т-клеток методом проточной 54 питометрии 2.2.5.Определение поверхностных маркеров CD4, CD8, CD69, CD25, CD71, CD95, HLA-DR, CD62L, CD27 на CD45RA+ и CD45RO+ Т-клетках методом 55
проточной питометрии
2.2.5.1. Оценка экспрессии Т-клетками маркеров, определяющих степень их дифференцировки
2.2.5.2. Оценка экспрессии Т-клетками молекул активации и пролиферации 59
2.2.5.3. Оценка экспрессии Т-клетками молекул поздней активации и апоптоза 61 2.2.6. Методы статистического анализа данных
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований 68
3.1. Оценка эффектов цитокинов, имеющих общую у-цепь рецепторов (rIL-2, rIL-7 и rIL-15) на жизнеспособность и общее количество клеток (10 /мл) в культурах CD45RA и CD45RO Т-лимфоцитов, в условиях гомеостатической и активационной моделей культивирования in vitro 71
3.2. Оценка эффектов цитокинов, имеющих общую у-цепь рецепторов (rIL-2, rIL-7 и rIL-15), на соотношение основных субпопуляций Т-клеток: CD3 CD4 и CD3+CD8+ в культурах CD45RA+ и CD45RO+ Т-лимфоцитов, в условиях гомеостатической и активационной моделей культивирования in vitro
3.3. Оценка эффектов цитокинов, имеющих общую у-цепь рецепторов (IL-2, IL-7, IL-15) на мембранную экспрессию молекул CD62L и CD27, определяющих соотношение разных фенотипов Т-клеток по степени дифференцировки: наивный (CD45RA+CD45R0 CD62L+CD27+), центральный (CD45RO+ CD62L CD27 ) и гетерогенные популяции эффекторных Т-клеток: CD27+CD62L", CD27CD62L+; CD27CD62L", в CD45RA+ - и CD45RO+ - Т-культурах, в условиях гомеостатической и активационной моделей культивирования in vitro
3.4. Оценка эффектов цитокинов, имеющих общую у-цепь рецепторов (rIL-2, rIL-7 и rIL-15) на мембранную экспрессию молекул ранней активации (CD69; CD25), пролиферации (CD71), поздней активации (HLA-DR и CD56) и апоптоза (CD95) в разных субпопуляциях Т-лимфоцитов (CD4; CD8) в CD45RA+ - и CD45RO - Т-культурах, в условиях гомеостатической и активационной моделей культивирования in vitro
105 161 162
3.4.1. Мембранная экспрессия молекулы ранней активации (CD69) 83
3.4.2. Мембранная экспрессия молекулы активации - CD25 (IL2-Ra) 85
3.4.3. Мембранная экспрессия молекулы пролиферации - CD71 87
3.4.4. Мембранная экспрессия молекулы апоптоза - CD95 95
3.4.5. Мембранная экспрессия молекулы поздней активации - HLA-DR 100
ГЛАВА 4. Обсуждение полученных результатов
Выводы
Список литературы
