Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 10
1.1 Канцерогенез 11
1.2 Генетические концепции канцерогенеза
1.2.1 Мутационная концепция канцерогенеза 23
1.2.2 Анеуплоидная концепция канцерогенеза 25
1.2.3 Эпигенетическая концепция канцерогенеза
1.3 Хромосомные аномалии при раке молочной железы 31
1.4 Метилирование ДНК при раке молочной железы 39
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования 53
2.1 Материал 53
2.2 Морфологическое исследование 56
2.3 Выделение ДНК 57
2.4 Сравнительная геномная гибридизация
2.4.1 Получение препаратов метафазных хромосом 59
2.4.2 Мечение тестируемой и контрольной ДНК 60
2.4.3 Постановка гибридизации 61
2.4.4 Детекция гибридизационных сигналов 62
2.5 Анализ статуса метилирования ДНК с помощью биологического микрочипа 63
2.6 Метилспецифическая ПЦР с бисульфитной модификацией ДНК 65
2.6.1 Бисульфитная модификация ДНК 65
2.6.2 Метилспецифическая ПЦР і
2.6.3 Обработка ДНК CpG-метилазой 66
2.7 Статистический анализ 68
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение 71
3.1 Молекулярно-цитогенетический анализ тканей молочной железы и регионарных лимфатических узлов 71
3.1.1 Спектр и частота хромосомных аномалий тканей молочной железы и регионарных лимфатических узлов 71
3.1.2 Корреляции хромосомных аберраций и клинических параметров у больных раком молочной железы 89
3.2 Изучение статуса метилирования ДНК в тканях молочной железы и
регионарных лимфатических узлов 95
3.2.1 Межгрупповой анализ дифференциального метилирования генов в тканях молочной железы и регионарных лимфатических узлов с метастазами 96
3.2.2 Оценка статуса метилирования генов контроля клеточного цикла RB1, р14АЩ CDKN2B 124
Заключение 135
Выводы 144
Список литературы 147
