Введение
Глава I. Обзор литературы 11
Клетки харовых водорослей — классический объект мембранной биологии 11
Неоднородное светозависимое распределение рн и фотосинтетической активности вдоль Клетки Chara 13
Первичные процессы в ответной реакции растительных клеток на механический стресс 19
Круговое движение цитоплазмы 23
Глава II. Материалы и методы 32
Объект и среда 32
Экспериментальная установка 32
Микроэлектродные измерения рн 34
Измерения флуоресценции хлоропластов с помощью метода насыщающих световых импульсов 35
Механическая стимуляция клеток 37
Измерение мембранного потенциала 38
Локальная фотостимуляция клетки 38
Удаление хлоропластов 40
Электрическая стимуляция клеток 40
Применение ингибиторов и мембраноактивных агентов 40
Анализ экспериментальных данных и статистическая обработка результатов 41
ГЛАВА III.Результаты и интерпретация 42
Роль ионных механизмов и латерального транспорта в ответе растительной клетки на механический стресс 42
1. Образование щелочной зоны на поверхности клетки при микроперфорации 42
1.1. Изменения рН апопласта в месте укола клеточной стенки 42
1.2. Пространственное распределение рНо возле места укола КС 46
1.3. Изменения рН на поверхности клетки при повреждении тонопласта 48
1.4. Отток Н+ из вакуоли в цитоплазму в области перфорации 50
2. Основные компоненты клеточного ответа – сдвигов рНо – на механический стресс 52
2.1. Влияние осмотического давления среды 53
2.2. Участие Са2+ 55
2.3. Участие цитоскелета 58
3. Роль хлоропластов в ответной реакции на микроповреждение клеточной стенки 63
3.1. Зависимость щелочного сдвига рН апопласта при механостимуляции от условий освещения 63
3.2. Влияние диурона на сдвиги рНо при микроперфорации 64
3.3. Измерения рН при микроперфорации участков клетки с удаленными хлоропластами 65
4. Различия механизмов образования щелочных зон в апопласте при действии света и микроперфорации 67
Дальние взаимодействия хлоропластов, опосредованные латеральным транспортом молекул с потоком цитоплазмы 70
1. Изменения фактического уровня флуоресценции хлоропластов (F ) при локальном освещении удаленного участка клетки 72
1.1. Дальняя латеральная передача фотоиндуцированного сигнала 72
1.2. Световая индукция ответа флуоресценции хлоропластов на дистанционное локальное освещение 76
1.3. Роль переносчиков электронов на акцепторной стороне ФСI 80
1.4. Зависимость фотоиндуцированных изменений F от скорости потока цитоплазмы 85
1.5. Фотоиндуцированные изменения F при кратковременной остановке движения цитоплазмы 90
2. Роль дистанционных взаимодействий между хлоропластами при микроповреждениях клеточной стенки 98
2.1. Влияние локального освещения на рН апопласта при микроперфорации клеточной стенки 98
2.2. Сдвиги рН в зоне микроперфорации КС при освещении удаленного участка 101
ГЛАВА IV.Обсуждение 105
Выводы 115
Список литературы 117
