Введение
Глава 1. Обзор литературы. 7
1.1. Успехи традиционной селекции земляники садовой. 7
1.2. Молекулярная селекция земляники садовой. 11
1.2.1. Агробактериальная трансформация земляники садовой. 11
1.2.2. Основные развивающиеся направления молекулярной селекции земляники садовой . 20
1.3. Стратегии повышения антигрибной устойчивости. 26
1.3.1. Использование PR-протеинов для повышения устойчивости к патогенам. 27
1.3.2. Использование дефензинов для повышения устойчивости растений к фитопатогенам. 36
1.3.3. Другие стратегии повышения устойчивости к грибам фитопатогенам . 38
1.4. Молекулярная селекция на изменение вкусовых качеств плодов. 42
Заключение по обзору литературы. 48
Глава 2. Цели и задачи исследований. 50
Глава 3. Объекты и методы исследований. 51
3.1. Объекты исследований. 51
3.2. Культура земляники садовой in vitro. 51
3.3. Регенерация адвентивных побегов из листовых эксплантов. 51
3.4. Адаптация растений к условиям in vivo. 53
3.5. Агробактериальная трансформация земляники садовой. 53
3.6. Выделение тотальной растительной ДНК земляники садовой. 56
3.7. ПЦР-анализ трансгенных линий. 58
3.8. Гистохимический и флюориметрический анализы GUS-активности. 60
3.9. Иммунологический анализ экспрессии тауматина И. 61
3.10. Органолептический анализ плодов земляники садовой. 62
3.11. Анализ влияния экспрессии тауматина II на устойчивость земляники садовой к Botrytis cinerea. 63
3.12. Полевые испытания трансгенных растений земляники садовой с геном суперсладкого белка тауматин II. 66
Глава 4. Результаты исследований. 69
4.1. Адвентивный органогенез из листовых эксплантов земляники садовой. 69
4.2. Генетическая трансформация земляники садовой сорта Фейерверк. 71
4.2.1. Интродукция безинтронного и интрон-содержащего генов uidA. 74
4.2.2. Интродукция в землянику садовую гена редечного дефензина rs-afp2 . 84
4.2.3. Интродукция в землянику садовую гена суперсладкого белка thaumatin II. 89
4.3. Полевые испытания трансгенных растений земляники садовой с геном суперсладкого белка тауматин II. 105
Выводы. 114
Список использованной литературы. 116
