Введение
2.Обзор литературы 11
2.1. Механизмы Са2+- сигнализации в клетках 11
2.1.1. Механизмы мобилизации Са2+ из внутриклеточных депо 12
2.1.1.1. Фосфоинозитидный путь передачи сигнала 14
2.1.1.2. Структура 1Р3-рецептора 19
2.1.1.3. Механизмы регуляции 1Р3-рецептора 21
2.1.1.4.Биофизические характеристики 1Р3-чувствительных каналов Са2+-выброса 24
2.1.1.5. ФосфоинозитиДкипа?^.т;л^.;гг.^> 25
2.1.2. Механизмы входа Са2+ в невоЗТтудттш(^ядак* 28
2.1.2.1. Депо-зависимый вход Са2+ в клетки 29
2.1.2.2. Модели депо-зависимого входа Са2+ 31
2.1.2.2.1. Модели с участием водорастворимых вторичных посредников 32
2.1.2.2.2. Модель "конформационного связывания ("conformational coupling" model) 36
2.1.2.2.3. Модели, предполагающие встраивание в плазматическую мембрану мембранных везикул, содержащих депо-зависимые Са -каналы 39
2.1.2.2.4. Модель связывания по типу секреции (secretion-like coupling model) 42
2.1.2.3. Биофизические характеристики депо-зависимых Са2+- каналов 43
2.1.2.4. Молекулярная природа депо-зависимых Са2+-каналов 45
2.1.2.5. Функциональная роль депо-зависимого входа Са2+ 52
2.1.2.6. Возможная роль депо-зависимого входа Са2+ в различных патологических процессах 52
2.2. Элементы цитоскелета 54
2.2.1. Актиновые филаменты 55
2.2.2. Микротрубочки 59
2.2.3. Роль структур цитоскелета в процессах внутриклеточной сигнализации 62
2.2.4. Цитоскелет в макрофагах 64
2.3. Заключение по обзору литературы и постановка задачи исследования. 67
3. Материалы и методы исследования 69
3.1. Объект исследования 69
3.2. Растворы 69
3.3. Установка для измерения внутриклеточной концентрации Са2+ с помощью флуоресцентного Са2+-зонда Fura-2AM 70
4.Результаты и обсуждение 73
4.1. Влияние агентов, вызывающих реорганизацию элементов цитоскелета, на Са -сигналы в макрофагах 73
4.1.1. Влияние агентов, модифицирующих струїстуру цитоскелета, на Са -сигналы, вызванные ингибиторами эндоплазматичских Са2+-АТФаз 76
4.1.2. Влияние агентов, вызывающих модификацию элементов цитоскелета, на Са2+ сигналы, индуцированные пуринергическими агонистами 81
4.1.3. Влияние латрункулина В на Са -сигналы в макрофагах 86
4.1.4. Влияние стабилизатора актиновых филамептоп джасплакинолида на Са -сигналы в макрофагах 90
4.1.5. Влияние стабилизатора микротрубочек таксола на Са2+-сигналы, вызванные пуринергическими агонистами или ингибиторами эндоплазматических Са2+-АТФаз 94
4.2. Влияние ингибиторов фосфоинозитидкиназ на Са2+ -сигналы в макрофагах 107
4.3. Влияние ингибитора везикулярного транспорта брефельдина А на Са2+-
сигналы в макрофагах 112
5. Общее заключение 119
6. Выводы 124
7. Список литературы 126
